[发明专利]一种检测脂肪酰胺水解酶的荧光探针及其应用

权利要求书

1.一种检测脂肪酰胺水解酶的荧光探针，其特征在于：该探针底物可被脂肪酰胺水解酶特异性催化，使探针底物中的葡糖醛酸苷键分解，探针结构式如式（1）所示，

该探针底物为7-(全顺二十碳-5, 8, 11, 14-四烯)酰胺试卤灵。

2.根据权利要求1所述的一种检测脂肪酰胺水解酶的荧光探针的应用，其特征在于：采用7-(全顺二十碳-5, 8, 11, 14-四烯)酰胺试卤灵作为脂肪酰胺水解酶的特异性底物，进行水解反应，通过定量检测单位时间内的7-氨基试卤灵的生成率来定量测定不同生物体系中脂肪酰胺水解酶的活性。

3.根据权利要求2所述的一种检测脂肪酰胺水解酶的荧光探针的应用，其特征在于：所述体外孵育反应条件为：底物浓度介于1/10~10 K_m之间；孵育体系pH介于5.5 ~ 10.5之间；反应温度介于20 ~ 60 ^oC之间。

4.根据权利要求2所述的一种检测脂肪酰胺水解酶的荧光探针的应用，其特征在于：所述生物体系为重组表达脂肪酰胺水解酶、细胞样品、人或动物组织、植物、微生物。

5.根据权利要求2所述的一种检测脂肪酰胺水解酶的荧光探针的应用，其特征在于：所述底物消除率或产物的生成率低于20%。

6.根据权利要求2所述的一种检测脂肪酰胺水解酶的荧光探针的应用，其特征在于：该探针底物的酶解产物7-氨基试卤灵具有荧光，酶解产物的检测条件为激发波长550 nm，最大发射波长为592 nm。

7.根据权利要求2所述的一种检测脂肪酰胺水解酶的荧光探针的应用，其特征在于：该探针底物还可用于脂肪酰胺水解酶抑制剂的快速筛选及抑制能力的定量评价。

8.根据权利要求2所述的一种检测脂肪酰胺水解酶的荧光探针的应用，其特征在于：该探针底物也可作为载体及动物整体脂肪酰胺水解酶的探针底物，评估脂肪酰胺水解酶的个体及种属差异。

9.根据权利要求2所述的一种检测脂肪酰胺水解酶的荧光探针的应用，其特征在于：该探针可用于尿中脂肪酰胺水解酶活性评估。

10.根据权利要求2所述的一种检测脂肪酰胺水解酶的荧光探针的应用，其特征在于：该探针应用于脂肪酰胺水解酶中草药类抑制剂的高通量筛选。