[发明专利]血液中以氨基酸和酰基肉碱为靶向目标代谢组学分析方法

说明书

本发明的血液中以氨基酸和酰基肉碱为靶向目标代谢组学分析方法它包括以下步骤：(一)、收集一定数量的新鲜血液样本，得到血清或者血浆样本，按照血液样本贡献者的鉴定结果将上述血清或者血浆样本分成样本群和对照群；(二)、对样本群和对照群中的每个血液样本进行靶向代谢组学前处理；(三)、将样本群和对照群中的每个血液样本送入高效液相色谱串联质谱仪中，对靶向目标物进行精准定量，得到样本群和对照群中的每个血液样本的每种靶向目标物的具体数值；(四)、比较样本群和对照群的每种靶向目标物，选出具有显著差异的靶向目标物；(五)、建立雷达模型，将具有显著差异的靶向目标物画在雷达模型中，找到具有显著差异的靶向目标物之间关系。

技术领域

本发明涉及血液LC-MS/MS代谢组学研究领域，尤其是以氨基酸和酰基肉碱为靶向目标代谢组学分析方法。

背景技术

人体内小分子代谢物是参与人体新陈代谢的重要生命物质，包括氨基酸、有机酸等。小分子代谢物在体内的水平反映了细胞所处的环境，对机体的生命活动有重要影响。

氨基酸作为机体蛋白质组成成分，不仅是构建蛋白质的基本单位，还在机体内发挥重要生理功能：(1)起氮平衡作用，当每日膳食中蛋白质的质和量适宜时，摄入的氮量由粪、尿和皮肤排出的氮量相等，称之为氮的总平衡。实际上是蛋白质和氨基酸之间不断合成与分解之间的平衡。正常人每日食进的蛋白质应保持在一定范围内，突然增减食入量时，机体尚能调节蛋白质的代谢量维持氮平衡。食入过量蛋白质，超出机体调节能力，平衡机制就会被破坏。完全不吃蛋白质，体内组织蛋白依然分解，持续出现负氮平衡，如不及时采取措施纠正，终将导致抗体死亡。(2)转变为脂肪，氨基酸分解代谢所产生的a－酮酸，随着不同特性，循糖或脂的代谢途径进行代谢。a－酮酸可再合成新的氨基酸，或转变为糖或脂肪，或进入三羧循环氧化分解成CO2和H2O，并放出能量。(3)产生一碳单位，某些氨基酸分解代谢过程中产生含有一个碳原子的基团，包括甲基、亚甲基、甲烯基、甲炔基、甲酚基及亚氨甲基等。一碳单位具有一下两个特点：①不能在生物体内以游离形式存在；②必须以四氢叶酸为载体。能生成一碳单位的氨基酸有：丝氨酸、色氨酸、组氨酸、甘氨酸。另外蛋氨酸(甲硫氨酸)可通过S～腺苷甲硫氨酸(SAM)提供“活性甲基”(一碳单位)，因此蛋氨酸也可生成一碳单位。一碳单位的主要生理功能是作为嘌呤和嘧啶的合成原料，是氨基酸和核苷酸联系的纽带。(4)参与构成酶参与构成酶、激素、部分维生素。含氮激素的成分是蛋白质或其衍生物，如生长激素、促甲状腺激素、肾上腺素、胰岛素、促肠液激素等。有的维生素是由氨基酸转变或与蛋白质结合存在。酶、激素、维生素在调节生理机能、催化代谢过程中起着十分重要的作用。

有机酸在人体生命活动中参与多项生化反应，是人体重要的生命物质。具有抑菌、抗炎、抗病毒、抗突变、抗癌作用；能增加冠状动脉血流量、抑制脑组织脂质过氧化物生成、软化血管、促进钙、铁元素的吸收。有机酸在体内参与能量代谢的主要形式为酰基肉碱。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供血液LC-MS/MS靶向小分子目标物(氨基酸和酰基肉碱)代谢组学的分析方法。该方法具有应用性强、效率高等特点，可广泛用于各种目的的靶向小分子目标物(氨基酸和酰基肉碱)的代谢组学研究。

为了完成本申请的发明目的，本申请采用以下技术方案：

本发明的一种血液中以氨基酸和酰基肉碱为靶向目标代谢组学分析方法，其中：它包括以下步骤：

(一)、收集一定数量的新鲜血液样本，对上述血液样本进行分离，得到血清或者血浆样本，按照血液样本贡献者的鉴定结果将上述血清或者血浆样本分成样本群和对照群；

(二)、对样本群和对照群中的每个血液样本进行靶向代谢组学前处理；

(三)、将样本群和对照群中的每个血液样本送入高效液相色谱串联质谱仪中，在高效液相色谱串联质谱仪中对靶向目标物进行精准定量，得到样本群和对照群中的每个血液样本的每种靶向目标物的具体数值；