[发明专利]一种估算不同食性土壤线虫生物量的方法

说明书

本发明公开了一种估算不同食性土壤线虫生物量的方法，其步骤：A、采集土壤样品、提取线虫、热杀死线虫、固定线虫、制片和进行形态学鉴定；B、在显微镜下按照检索依据将线虫划分到四个食性类群，即食细菌、食真菌、植食性和杂食捕食性，对每条线虫拍照并用相关测量软件测量最大体宽，该步骤中不对线虫体长进行测量，根据食性按最大体宽估算；C、根据不同食性类群的生物量计算公式分别计算线虫的生物量大小。方法是根据不同食性线虫体长和最大体宽的线性相关关系，对传统估算方法进行的优化和改进，只需测量线虫最大体宽，简便易行，操作简单，具有极高的准确度，提高了线虫生物量估算的效率。

技术领域

本发明涉及土壤线虫科学研究领域，更具体涉及一种估算不同食性土壤线虫生物量的方法，适合于土壤线虫生物量的测算。

背景技术

土壤线虫是多细胞生物中数量最多的种类，它们普遍分布于全球各种生态系统中。土壤线虫在生态系统生物地球化学循环过程中起着重要的作用，它们对环境变化响应敏感在作为生态指示生物方面发挥着巨大作用，且它们食性广泛占据食物网的关键链接，土壤线虫在生物地球化学循环、生态指示、食物网营养级关系等研究领域受到广泛关注(Bongers and Ferris,1999；Nneher,2010)。土壤线虫食性组成及其生物量的大小是决定其在生物地球化学循环过程中贡献量的最重要指标(Ferris,2010)，传统的线虫生物量(W)的估算必须通过测量线虫体长(L)和最大体宽(D)来进行计算，计算公式为W＝(L×D²)/(1.6×10⁶)。然而，由于线虫身体细长，往往在对标本进行热杀死固定后呈现出多样化的体型，这极大的增加了线虫体长测量的工作量。相比于线虫体长的测量，其最大体宽的测量十分简单快速。因此，有必要对线虫生物量估算方法进行改进，以提高线虫生物量分析测算的工作效率。

发明内容

本发明的目的是在于提供了一种估算不同食性土壤线虫生物量的方法。方法易行，操作简便，该方法是根据线虫体长和最大体宽的极显著线性相关关系，利用最大体宽(测定简便)对体长(测定耗时)进行估算，进而使线虫生物量估算公式由两个变量简化为一个更加简单易测的变量，达到提高了线虫生物量估算效率，为土壤线虫生物量相关研究提供了更加便捷和有效的估算方法。

为了实现上述的目的，本发明采用以下技术措施：

实测获得不同生态系统的土壤线虫体长和最大体宽数据，将线虫按照四个食性类群(食细菌、食真菌、植食性和杂食捕食性)分类并分别对各食性的体长和最大体宽的相关关系进行统计分析，结果表明各食性的体长和最大体宽之间均存在极显著的相关关系，然后以此为依据提出了各食性线虫体长和体宽的拟合方程，进而将线虫的生物量估算公式中的体长用体宽进行代替，分别提出以最大体宽作为唯一测量指标的针对各食性线虫的生物量估算公式。

一种估算不同食性土壤线虫生物量的方法，其步骤是：

A、采集土壤样品、提取线虫、热杀死线虫、固定线虫、制片和进行形态学鉴定；

B、在显微镜下按照一定检索依据将线虫划分到四个食性类群，即食细菌(Ba)、食真菌(Fu)、植食性(He)和杂食捕食性(OmPr)，对每条线虫拍照并用相关测量软件测量最大体宽(D，单位：μm)。有别于传统的线虫生物量测算技术中要求同时测量体长和最大体宽的技术要求，该步骤中不需要对线虫体长进行测量。由于线虫体长测量比线虫最大体宽测量消耗更多的时间，因此极大的提高了线虫体型测量所消耗的时间，按线虫样品平均数量和线虫体型平均复杂程度估算，单个样品的平均分析时间可节省60分钟以上，极大的提高了测量的时间效率；

C、根据不同食性类群的生物量计算公式分别计算线虫的生物量大小(W，单位：μg)。各食性线虫生物量计算公式如下：

食细菌线虫生物量W_Ba＝(19.192×D_Ba³)/(1.6×10⁶)