[发明专利]一种经优化的高温酸性海藻糖酶TreMT1及其编码基因与应用有效

专利信息
申请号: 201910153634.3 申请日: 2019-02-28
公开(公告)号: CN109652394B 公开(公告)日: 2021-01-19
发明(设计)人: 潘力;董良波;王斌 申请(专利权)人: 华南理工大学
主分类号: C12N9/24 分类号: C12N9/24;C12N15/56;C12N15/80;C12N1/15;C12P7/06;C12P13/14;C12R1/685
代理公司: 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 代理人: 何淑珍;江裕强
地址: 510640 广*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 优化 高温 酸性 海藻 tremt1 及其 编码 基因 应用
【权利要求书】:

1.一种经优化的高温酸性海藻糖酶TreMT1,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种权利要求1所述经优化的高温酸性海藻糖酶TreMT1的编码基因,其特征在于,核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.一种重组表达载体,其特征在于,插入了权利要求2中所述SEQ ID NO.2所述核苷酸序列。

4.根据权利要求3所述的重组表达载体,其特征在于,包含有pMD20-T载体、黑曲霉中性淀粉酶启动子PamyA、黑曲霉tef终止子、构巢曲霉尿嘧啶生物合成的基因pyrG、黑曲霉中性淀粉酶编码基因最后1000bp序列以及所述经优化的高温酸性海藻糖酶TreMT1的编码基因。

5.一种转基因细胞系,其特征在于,含有权利要求3所述的重组表达载体;所述转基因细胞系为黑曲霉(Aspergillus niger)DMT-17,于2018年12月17日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2018902。

6.权利要求2所述经优化的高温酸性海藻糖酶TreMT1的编码基因或权利要求3所述重组表达载体在表达所述经优化的高温酸性海藻糖酶TreMT1中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,包括以下步骤:

(1)构建经优化的高温酸性海藻糖酶TreMT1的重组表达载体;

(2)用步骤(1)构建的重组表达载体转化宿主细胞,得到重组菌株即转基因细胞系,所述宿主细胞为黑曲霉;

(3)培养重组菌株,用发酵培养基诱导所述经优化的高温酸性海藻糖酶TreMT1的表达;

(4)回收并纯化所述经优化的高温酸性海藻糖酶TreMT1。

8.权利要求5所述转基因细胞系在制备权利要求1所述经优化的高温酸性海藻糖酶TreMT1中的应用。

9.权利要求1所述的一种经优化的高温酸性海藻糖酶TreMT1在酒精发酵与谷氨酸发酵中的应用。

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