[发明专利]水溶性化妆品中金黄色葡萄球菌定性标准样品及制备方法

说明书

本发明属于化妆品微生物学检测方面的质量控制领域，特别涉及一种水溶性化妆品中金黄色葡萄球菌定性标准样品及其制备方法。水溶性化妆品中金黄色葡萄球菌定性标准样品包括目标菌和背景菌群，所述目标菌是金黄色葡萄球菌，所述背景菌群由蜡样芽胞杆菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌、大肠埃希氏菌组成。本发明样品中菌群的组成及含量与实际样品一致；标准样品与实际样品基体成分一致；均匀性、稳定性符合标准样品要求，可以最大程度保证标准样品的稳定性；样品的制备方法、工艺简单，成功率高。

技术领域

本发明属于化妆品微生物学检测方面的质量控制领域，特别涉及一种水溶性化妆品中金黄色葡萄球菌定性标准样品及其制备方法。

背景技术

化妆品是许多人日常生活中的个人护理产品，其本身的作用及安全性直接关系到使用者的身体健康安全。化妆品中微生物直接反映着化妆品被细菌污染的程度，以及生产单位所用的原料、工具设备、工艺流程、操作者的卫生状况，是对化妆品进行卫生学评价的综合依据。水溶性化妆品微生物学检验领域非常特殊。目前，国内外尚未有机构制备水溶性化妆品微生物学标准样品和大规模生产的先例，仍属空白领域。目前国内已有的仅是标准菌株或仅含有纯菌的适用于食品领域的标准样品，与实际的样品不一致，无法满足日常实验室质量控制等需要。

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属(Staphylococcus)，可引起许多严重感染，典型的金黄色葡萄球菌为球形，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽孢、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。背景菌和目标菌含量的高低也是制备该标准样品的重要考虑因素，通常实际样品中微生物含量较低，因此所制备的标准样品中背景菌和目标菌含量应与实际样品保持一致。因此，综合考虑金黄色葡萄球菌的生化特性，选取性质相对稳定的标准菌株作为目标菌群对保证样品的均匀性和稳定性十分重要，并且样品的均匀性和稳定性与冻干的菌种、冻干的工艺条件、冻干保护剂的使用、再水化的介质等均有密切的关系。

金黄色葡萄球菌在外界分布较广，抵抗力也较强，能引起人体局部化脓性病灶，严重时可导致败血症，所以化妆品中检验金黄色葡萄球菌具有重要意义。因此，制备均匀性与稳定性俱佳的金黄色葡萄球菌定性样品，可以避免金黄色葡萄球菌检验的随意性和不确定性，真实地反映检测实验室的能力。这对提高实验室质量控制水平，保障水溶性化妆品的质量具有特殊重要的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种与实际样品一致的标准样品，用于化妆品检测过程中质量控制、人员培训考核、方法验证、培养基或试剂验收和质量控制等用途，均匀性、稳定性符合标准样品的要求，本发明的另一个目的是提供该样品的制备方法，工艺简单，成功率高。

本发明为实现上述目的所采用的技术方案是：水溶性化妆品中金黄色葡萄球菌定性标准样品，其特征是：包括目标菌与背景菌群，所述目标菌是金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)，所述背景菌群由蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)、奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)、大肠埃希氏菌(E.coil)组成。

所述样品基体为化妆水，化妆水体积分数为0.5％；保护剂以海藻糖和无菌水组成，其中海藻糖体积分数为10％。

所述样品中目标菌的目标浓度为10²～10³CFU/mL，背景菌群的目标浓度为10³CFU/mL。

水溶性化妆品中金黄色葡萄球菌定性标准样品的制备方法，其特征是：包括冻干保护剂的配制、样品冻干、样品的均匀性和稳定性试验、样品定值四个步骤，其中样品冻干过程为：菌株复苏传代—增菌—菌悬液配制—冻干—包装—储存，具体过程为：

(1)菌株复苏传代