[发明专利]一种环状RNA hsa_circ_0012152及其应用

说明书

本发明公开了一种环状RNA hsa_circ_0012152，其线性碱基序列如SEQ ID NO.1所示；本发明还公开了环状RNA hsa_circ_0012152作为儿童急性髓细胞白血病的分子标志物的应用；以及环状RNA hsa_circ_0012152含量的检测试剂在制备儿童急性髓细胞白血病的诊断试剂盒中的应用。本发明首先证实hsa_circ_0012152基因的客观存在；通过检测儿童急性髓细胞白血病AML中hsa_circ_0012152基因表达情况，发现其表达水平显著升高；因此，hsa_circ_0012152基因可作为诊断儿童急性髓细胞白血病AML的分子标志物，使儿童AML诊断更加准确、快速，为hsa_circ_0012152用于儿童AML的诊断以及预后分析提供新的理论依据和新的标志物。

技术领域

本发明涉及白血病诊断技术领域，尤其是一种环状RNA hsa_circ_0012152及其在制备儿童急性髓细胞白血病诊断试剂中的应用。

背景技术

急性白血病是儿童最常见的恶性肿瘤，约占该时期恶性肿瘤的35％，其发病时骨髓中异常的原始细胞及幼稚细胞大量增殖，蓄积于骨髓并抑制正常造血，广泛浸润肝、脾、淋巴结等髓外脏器。急性白血病通常可以分为急性淋巴细胞白血病和急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia，AML)两大类。尽管AML仅占急性白血病的20％，但其病死人数却占儿童急性白血病的50％以上。由于急性白血病的病情发展程度不一，且分组亚型较多，所以在临床上对白血病的诊断显得尤为重要。如果病人在患有此种疾病以后，没有第一时间或者实施特殊的方式对疾病进行救治，患者的生命将受到严重威胁，其生存的时间可能会缩短到90天以内，这不仅严重影响了患儿的生活质量和生命健康，同时给患者家庭带来沉重的负担。因此，尽快尽早明确诊断对于临床治疗和患者预后生存有着密切关系，初诊期严谨、科学的检测方法，寻找新的高效、稳定的监测指标是近年来关注的热点。

随着肿瘤分子生物学技术的革新，研究者们发现了一类区别于传统线性RNA的RNA家族新成员——环状RNA(circular RNA，circRNA)，它不具有5'末端帽子和3'末端poly(A)尾巴，是以共价键形成环形结构的RNA分子。研究发现在细胞中存在数以万计的序列高度保守的circRNA，这些circRNA主要定位于细胞质中，在人类细胞中广泛表达，它的主要特征之一是circRNA表达丰度高，部分circRNA的表达丰度是其线性异构体的10倍之多，并且还具有明显的组织特异性、时序特异性和疾病特异性；主要特征之二是它比线性RNA更稳定，不易被核酸外切酶降解。相比mRNA的一般半衰期为10小时，胞内的circRNA半衰期长达48小时。这些特征提示circRNA在生物的生命过程中发挥着重要作用，并且可能作为稳定的生物标志物用于临床诊断及预后分析。

目前对儿童AML的诊断多采用临床表现、血象、骨髓象的改变做出判断，同时结合细胞形态、免疫学、细胞遗传学和分子生物学进行分类和分型，但是，在一些发病早期，症状不典型，特别是白细胞数正常或者减少者，其血涂片不易找到幼稚白细胞时，使得诊断发生困难。而且难以与其他一些疾病(如再生障碍性贫血、恶性组织细胞增多症等)区分开。因此，寻找更快速、更灵敏、更特异的诊断指标具有重要的临床意义。

发明内容

基于上述问题，本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种快速、灵敏、特异的儿童急性髓细胞白血病的诊断指标以及相应的诊断试剂盒。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案包括以下几个方面：

在第一个方面，本发明提供了一种环状RNA hsa_circ_0012152，所述环状RNA的线性碱基序列如SEQ ID NO.1所示。需要说明的是，本申请的发明人首次发现环状RNA hsa_circ_0012152在基因组上定位为chr1:44877652-44878394，对应的线性基因是RNF220(NM_018150)；该环状RNA由基因RNF220的第2个外显子区域单独环化而来，长742bp；目前尚无hsa_circ_0012152的功能应用的报道。