[发明专利]一种荆半夏离体块茎快速繁殖的方法

说明书

本发明公开了一种荆半夏离体块茎快速繁殖的方法，它包括外植体消毒灭菌、丛生芽诱导培养和离体块茎诱导培养三大环节，其技术的关键在于丛生芽诱导培养和离体块茎诱导培养两个阶段采用了两种不同的培养基。丛生芽诱导培养基为：MS培养基+蔗糖30g/L+琼脂8.6g/L+6‑BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L，pH值为5.8。与现有技术相比，本发明的优点是丛生芽的诱导最多可达33.4个/瓶，离体块茎的直径达到0.8cm，移栽成活达98％以上。通过该技术可解决荆半夏种质资源短缺难题，扩大了荆半夏的种植面积，推动荆半夏产业的迅速发展。

技术领域

本发明涉及一种植物快速繁殖的方法，具体为一种荆半夏离体块茎和组织培养快速繁殖的方法。

背景技术

半夏(Pinellia ternata)为天南星科半夏属多年生草本植物，株高15～30厘米；块茎近球形，直径1～2厘米；叶出自块茎顶端，叶柄长6～23厘米，一年生的叶为单叶，卵状心形；2～3年后，叶为三出复叶。半夏是一种常用的中药材，在588种中药处方中，半夏使用频率居第22位。具有降逆止呕、燥湿化痰、消痞散节的功效。近年来,研究发现半夏还有抗早孕、抗肿瘤、降血脂、护肝等功能。由于市场需求量大，野生半夏资源无法满足，现已有大规模的人工种植。但半夏人工种植所需种茎量大，成本高。目前，人工种植半夏每亩地需种茎300～400kg，购买这些种茎的成本约为6000～8000元，因此，人工种植半夏种茎的成本为6000～8000元/亩。这也是影响半夏人工种植效益的主要因素之一。因此，开发种茎高效繁殖方法是提高半夏人工种植效益的途径之一。

自然状态下，半夏可通过有性和无性两种方式进行繁殖。半夏雌雄花序在同一个佛焰苞中，属同株异花传粉，一般而言，只有较大块茎才能抽出佛焰苞，形成的种子在常规条件下萌发率相当低。因此，有性繁殖不是其主要繁殖方式。自然群体内大部分个体是源自无性繁殖产生的珠芽。珠芽繁殖是半夏无性繁殖的主要方式，珠芽着生在叶柄下部内侧面，有的会在三叶交汇处着生一珠芽。珠芽落于土中形成新植株，珠芽变成了块茎。半夏块茎偶尔也产生子块茎，子块茎能形成新个体。块茎繁殖是另一种无性繁殖方式。综上所述可见，自然状态下半夏繁殖效率低。

发明内容

本发明的目的在于提供一种荆半夏离体块茎快速繁殖的方法，可解决荆半夏种质资源短缺难题，扩大了荆半夏的种植面积，推动荆半夏产业的迅速发展。

本发明采用的技术方案如下：一种荆半夏离体块茎快速繁殖的方法，其特征在于方法步骤如下：

(1)取荆半夏块茎作为外植体，经消毒灭菌后接种于培养基中，培养条件：温度25±1℃，光照强度为1000～2000Lx，光照时间：10～12h/d，诱导荆半夏的块茎产生大量的丛生芽。

(2)半夏丛生芽生长到2cm左右后切去周围组织，接种于含有多效唑的培养基，培养条件：温度25±1℃，光照强度2000Lx，光照时间：10～12h/d。30天后形成0.8cm离体块茎。取出离体块茎，消毒清洗后，移栽至基质培养土中。

进一步的，所述培养基为MS培养基，蔗糖的添加量为30g/L,琼脂的添加量为8.6g/L，6-BA的添加量为0.4～1.0mg/L，NAA的添加量为0.05mg/L，多效唑的添加量为0.6mg/L，AC的添加量为0.05g/L，pH值为5.8。

进一步的，所述块茎标准直径为0.8cm。

本发明采用的另一个技术方案如下：一种荆半夏组织培养繁殖的方法，其特征在于按如下的步骤进行：

(1)以荆半夏块茎作为外植体，对荆半夏外植体的消毒灭菌；

(2)将步骤(1)的块茎切割成5mm×5mm小块，接入MS添加6-BA和NAA的培养基上，在25±1℃光照条件培养30天，可萌发出丛生芽；