[发明专利]分子标记MtD4在鉴定胡萝卜瓣化型雄性不育中的应用有效
申请号: | 201910128765.6 | 申请日: | 2019-02-21 |
公开(公告)号: | CN109628634B | 公开(公告)日: | 2021-12-24 |
发明(设计)人: | 庄飞云;欧承刚;曹琼文;陈姝敏;赵志伟 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分子 标记 mtd4 鉴定 胡萝卜 瓣化型 雄性不育 中的 应用 | ||
1.特异引物对,由引物F和引物R组成;
所述引物F为序列表的序列8所示的单链DNA分子;
所述引物R为序列表的序列9所示的单链DNA分子。
2.一种试剂盒,包括权利要求1所述特异引物对。
3.权利要求1所述特异引物对或权利要求2所述试剂盒的应用,为如下b1)-b5)中的任一种:
b1)鉴定待测胡萝卜携带DNA片段1还是DNA片段2;
b2)筛选携带所述DNA片段1且不携带所述DNA片段2的胡萝卜品种;
b3)筛选携带所述DNA片段2且不携带所述DNA片段1的胡萝卜品种;
b4)鉴定待测胡萝卜是否为瓣化型雄性不育;
b5)筛选瓣化型雄性不育的胡萝卜品种;
所述DNA片段1的核苷酸序列如序列表中序列14所示;
所述DNA片段2的核苷酸序列如序列表中序列15所示。
4.DNA片段1和/或DNA片段2;
所述DNA片段1的核苷酸序列如序列表中序列14所示;
所述DNA片段2的核苷酸序列如序列表中序列15所示。
5.权利要求4所述DNA片段1和/或所述DNA片段2的应用,为b4)或b5):
b4)鉴定待测胡萝卜是否为瓣化型雄性不育;
b5)筛选瓣化型雄性不育的胡萝卜品种。
6.一种鉴定待测胡萝卜是否为瓣化型雄性不育的方法,包括如下步骤:检测待测胡萝卜的基因型为基因型III还是基因型III’,基因型III的胡萝卜为瓣化型雄性不育,基因型III’的胡萝卜不为瓣化型雄性不育;
所述基因型III为待测胡萝卜的基因组DNA中含有权利要求4中所述DNA片段1且不含有所述DNA片段2;所述基因型III’为待测胡萝卜的基因组DNA中含有权利要求4中所述DNA片段2且不含有所述DNA片段1。
7.如权利要求6所述的方法,其特征在于:所述检测待测胡萝卜的基因型为基因型III还是基因型III’的方法为G1)或G2):
G1)以待测胡萝卜的基因组DNA为模板,采用权利要求1所述特异引物对进行PCR扩增,得到PCR扩增产物,然后进行如下判断:如果PCR扩增产物中具有266bp的DNA片段且不具有525bp的DNA片段、则待测胡萝卜的基因型为基因型III,如果PCR扩增产物中具有525bp的DNA片段且不具有266bp的DNA片段、则待测胡萝卜的基因型为基因型III’;
G2)以待测胡萝卜的基因组DNA为模板,采用权利要求1所述特异引物对进行PCR扩增,得到PCR扩增产物,然后进行测序;
如果PCR扩增产物含有序列表中的序列14所示的核苷酸序列且不含有序列表中的序列15所示的核苷酸序列、待测胡萝卜的基因型为基因型III,
如果PCR扩增产物含有序列表中的序列15所示的核苷酸序列且不含有序列表中的序列14所示的核苷酸序列、则待测胡萝卜的基因型为基因型III’。
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