[发明专利]一种昆虫病原线虫的快速清洗方法

权利要求书

1.一种昆虫病原线虫的快速清洗方法，包括步骤：

(1)清洗：将昆虫病原线虫固体培养方法得到的培养混合物放入到洗衣机的洗衣桶中，通过设置洗衣机洗衣程序，依次进行单次洗涤-脱水-漂洗-脱水或单次洗涤-脱水-漂洗-脱水-漂洗-脱水，同时收集洗衣机排出液；

所述洗衣机为波轮式单筒全自动洗衣机；洗衣机中的注水量与培养混合物的体积比为1～4：1；所述单次洗涤时间为4～12min；每次漂洗时间为3～5min；每次脱水时间为1～3min；清洗总时间为9～31min；脱水的转速均为300～500rpm；

(2)浓缩分离：将步骤(1)得到的排出液静置沉淀，弃上清；然后沉淀物用蒸馏水搅拌清洗，得到昆虫病原线虫浓缩液；

(3)保存：向步骤(2)得到的昆虫病原线虫浓缩液中加入苯并异噻唑啉-3-酮，然后用海绵吸附，密封包装后低温保存。

2.根据权利要求1所述的昆虫病原线虫的快速清洗方法，其特征在于，步骤(1)中，采用固体培养方法培养昆虫病原线虫18～30天后得到培养混合物。

3.根据权利要求1所述的昆虫病原线虫的快速清洗方法，其特征在于，步骤(1)中，所述单次洗涤时间为8min；每次漂洗时间为4min；每次脱水时间为1min。

4.根据权利要求1所述的昆虫病原线虫的快速清洗方法，其特征在于，步骤(1)中，所述单次洗涤的转速均为30～50rpm，所述漂洗的转速均为30～50rpm。

5.根据权利要求1所述的昆虫病原线虫的快速清洗方法，其特征在于，步骤(2)中，排出液是在倾斜水槽中静置沉淀20～30min；所述水槽为长方体水槽，槽内的长宽比为2～3:1，水槽和水平面之间的夹角为10～45°；沿倾斜方向，水槽较低的侧面上设置有清液排出口，所述清液排出口距水槽最底部的距离为5～20cm；水槽最底部设置有昆虫病原线虫浓缩液排出口；所述排出液静置沉淀后，上清液经清液排出口流出。

6.根据权利要求5所述的昆虫病原线虫的快速清洗方法，其特征在于，步骤(2)中，所述搅拌清洗是在倾斜水槽中进行；用蒸馏水搅拌清洗1～5次，搅拌清洗时间为1～2min；每次搅拌清洗后静置5～20min，上清液经清液排出口流出。

7.根据权利要求1所述的昆虫病原线虫的快速清洗方法，其特征在于，步骤(3)中，所述苯并异噻唑啉-3-酮的加入量是昆虫病原线虫浓缩液质量的0.5～2％。

8.根据权利要求1所述的昆虫病原线虫的快速清洗方法，其特征在于，步骤(3)中，所述昆虫病原线虫浓缩液和海绵的质量比为5～9:1～5。

9.根据权利要求1所述的昆虫病原线虫的快速清洗方法，其特征在于，步骤(3)中，所述海绵由碎海绵组成，每个碎海绵的体积为0.2～27cm³；每个碎海绵的孔隙密度为25～35ppi。