[发明专利]一种联合检测评估肿瘤康复状况的试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.一种联合检测评估肿瘤康复状况的试剂盒，包括检测β-半乳糖苷酶活性、DNA甲基化、游离DNA水平的试剂。

2.根据权利要求1所述的一种联合检测评估肿瘤康复状况的试剂盒，其特征在于，所述的检测试剂或试剂盒通过检测肿瘤患者术后β-半乳糖苷酶活性、DNA甲基化、游离DNA水平的情况，评估肿瘤患者术后的康复状况，为后续治疗提供指导意见。

3.根据权利要求1所述的一种联合检测评估肿瘤康复状况的试剂盒，其特征在于，所述的检测试剂或试剂盒是一种免疫及分子生物技术检测试剂或试剂盒。

4.根据权利要求1所述的一种联合检测评估肿瘤康复状况的试剂盒，其特征在于，所述的检测试剂，是检测β-半乳糖苷酶活性、DNA甲基化、游离DNA水平试剂的组合。

5.根据权利要求1所述的一种联合检测评估肿瘤康复状况的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒，包含检测β-半乳糖苷酶活性、DNA甲基化、游离DNA水平的试剂。

6.根据权利要求1所述的一种联合检测评估肿瘤康复状况的试剂盒，其特征在于，所述的检测β-半乳糖苷酶活性的试剂包括：

1）精密度微孔板10孔1块 2~8℃干燥保存；

2）标准品 2~8℃冷藏保存；

3）标准品稀释液 2~8℃冷藏保存；

4）酶标试剂 2~8℃冷藏保存；

5）封板膜；

6）洗涤液 2~8℃冷藏保存；

7）显色剂A 2~8℃避光冷藏保存；

8）显色剂B 2~8℃避光冷藏保存；

9）终止剂 室温保存。

7.根据权利要求1所述的一种联合检测评估肿瘤康复状况的试剂盒，其特征在于，所述的检测DNA甲基化的试剂包括：

1）DNA分离、DNA甲基化纯化部分与磁性微球方法相同试剂；

2）转化试剂：3N NAOH、3.6M亚硫酸氢钠（Sodium bisulfite）、3NHCL、4M NACL。

8.根据权利要求1所述的一种联合检测评估肿瘤康复状况的试剂盒，其特征在于，所述的检测游离DNA水平的试剂包括：

1）磁性微球（Magnetic Beads）：2.5%硅羟磁性微球；

2）裂解吸附液（Lysis Binding Buffer）：PH6.0-7.5，4 M盐酸胍、1 M氯化钠、20 mM三羟甲基氨基甲烷（Tris）、1%聚乙二醇单辛基苯基醚（triton X-100）、0.5% 十二烷基硫酸钠（SDS）、2 mM乙二胺四乙酸（EDTA）、20%异丙醇；

3）洗涤液I（Washing Buffer I）：60%异丙醇、0.5% 十二烷基硫酸钠（SDS）、1M 氯化钠；

4）洗涤液II（Washing Buffer II）：75%乙醇；

5）洗脱液（Exhaustion）：pH7.0，10mM 三羟甲基氨基甲烷（Tris）、2mM乙二胺四乙酸（EDTA）。

9.一种联合检测评估肿瘤康复状况的试剂盒的检测方法，其特征在于，所述的检测方法为：采用酶联技术（抗体夹心法）检测β-半乳糖苷酶含量、检测DNA甲基化4个靶点、采用磁性微球法分离检测游离DNA水平。

10.根据权利要求9所述的一种联合检测评估肿瘤康复状况的试剂盒的检测方法，其特征在于，所述的联合检测方法是通过β-半乳糖苷酶活性、DNA甲基化、游离DNA水平三项指标组合联合诊断可以作为肿瘤患者术后康复情况的标志物。