[发明专利]鳕鱼皮寡肽及其分离纯化方法和在制备ɑ-葡萄糖苷酶抑制剂及抗Ⅱ型糖尿病药物中的应用

权利要求书

1.一种鳕鱼皮寡肽，其特征在于，氨基酸序列为Glu-Gly-Gly-Tyr-Thr-Arg。

2.一种根据权利要求1所述的鳕鱼皮寡肽的分离纯化方法，其特征在于，包括：

(1)以阿拉斯加狭鳕鱼皮为原料，经蛋白酶酶解法制备鳕鱼皮胶原肽混合肽；

所述蛋白酶酶解法具体为：

将阿拉斯加狭鳕鱼皮、胰酶与水混合，在52～58℃、pH＝5.5～6.5下酶解6～10h；

以阿拉斯加狭鳕鱼皮的质量计，所述胰酶的加入量为0.15～0.25wt％；

所述阿拉斯加狭鳕鱼皮与水的质量比为1：4～8；

(2)采用截留分子量为3000Da的超滤膜对步骤(1)制备的鳕鱼皮胶原肽混合肽进行超滤处理，再经浓缩、干燥得到鳕鱼皮胶原肽；

(3)以水为流动相，采用葡聚糖凝胶色谱柱对步骤(2)制备的鳕鱼皮胶原肽进行粗分；

所述葡聚糖凝胶色谱柱的填料由葡聚糖凝胶树脂Sephadex G-25和葡聚糖凝胶树脂Sephadex G-50串联而成；所述葡聚糖凝胶树脂Sephadex G-25选自100目，葡聚糖凝胶树脂Sephadex G-50选自60目；所述流动相的流速为0.8～1.4mL/min；

(4)利用高效液相色谱技术将步骤(3)的粗分产物进一步分离，得到三种鳕鱼皮寡肽；

色谱柱：Angilent Eclipse XDB-C₁₈柱；

流动相：A液：0.05％三氟乙酸-水溶液；B液：0.05％三氟乙酸-乙腈溶液；

采用线性梯度洗脱，0～20min，5％～20％B；20～25min，20％～100％B；

流速为1.0mL/min，柱温为30℃，检测波长为220nm。

3.根据权利要求2所述的鳕鱼皮寡肽的分离纯化方法，其特征在于，步骤(1)中，所述蛋白酶酶解法：

将阿拉斯加狭鳕鱼皮、胰酶与水混合，在55℃、pH＝6.0下酶解8h；

以阿拉斯加狭鳕鱼皮的质量计，所述胰酶的加入量为0.20wt％；

所述阿拉斯加狭鳕鱼皮与水的质量比为1：6。

4.根据权利要求2所述的鳕鱼皮寡肽的分离纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，所述超滤膜选自中空纤维聚砜超滤膜。

5.一种根据权利要求1所述的鳕鱼皮寡肽在制备ɑ-葡萄糖苷酶抑制剂中的应用。

6.一种根据权利要求1所述的鳕鱼皮寡肽在制备抗Ⅱ型糖尿病药物中的应用。