[发明专利]同时测定牛奶中磺胺类、喹诺酮类、四环素类、氯霉素类、大环内酯类抗生素残留量的方法

权利要求书

1. 一种同时测定牛奶中磺胺类、喹诺酮类、四环素类、氯霉素类、大环内酯类抗生素残留量的方法，其特征在于：包括如下步骤：

一、标准溶液的配制

1）准确称取14种磺胺类标准品、15种喹诺酮类标准品、4种四环素类标准品、3种氯霉素类标准品、2种大环内酯类标准品，分别用甲醇溶解并定容至10mL，得到浓度为1 mg/mL的不同标准品储备液；

2）准确量取不同标准品储备液各0.1 mL，置于同一10 mL容量瓶中，加甲醇混匀并定容，配成浓度为10 µg/mL的混合标准品溶液；

3）准确移取一定量的混合标准品溶液，配成系列标准品溶液；

二、样品溶液的制备

1）准确称取1.00 g待测牛奶样品，加入5 mL 0.5%（v/v）甲酸乙腈溶液，漩涡震荡后超声10 min，再以5000 r/min离心5 min，取上清液；

2）取2 mL上清液加入QuEChERS试剂盒中，漩涡振荡1 min后，以5000 r/min离心5 min，取所得上清液0.5 mL，加入0.5 mL超纯水稀释混匀，经0.22 µm滤膜过滤，得样品溶液；

三、超高效液相色谱-串联质谱测定

1）将系列标准品溶液分别进行UPLC-MS/MS测定，然后以各目标组分的浓度与其对应的响应峰面积绘制标准曲线，并计算得到线性回归方程；

2）将样品溶液进行UPLC-MS/MS测定，再利用线性回归方程计算样品中残留抗生素的含量。

2. 根据权利要求1所述同时测定牛奶中磺胺类、喹诺酮类、四环素类、氯霉素类、大环内酯类抗生素残留量的方法，其特征在于：超高效液相色谱的检测条件为：Waters AcquityUPLC TSS T3色谱柱，规格为100 mm×2.1 mm，1.8 µm；流速为0.4 mL/min；柱温为40 ℃；进样量为2 µL；流动相A为0.1%（v/v）甲酸水溶液，流动相B为甲醇；梯度洗脱，其洗脱程序为：0.00-0.20min，流动相A的体积为95%，0.20-2.50min，流动相A的体积由95%降低至50%，2.50-4.50min，流动相A的体积由50%降低至5%，4.50-4.51min，流动相A的体积由5%提升至95%，4.51-8.00min，流动相A的体积维持在95%；

质谱的检测条件为：电喷雾离子源；磺胺类、喹诺酮类、四环素类、大环内酯类抗生素为正离子模式，毛细管电压：2.5 kV；氯霉素类为负离子模式，毛细管电压：-2.5 kV；多反应监测模式；离子源温度：150 ℃；脱溶剂温度：600 ℃；脱溶剂气和锥孔气均为氮气，流速分别为1000 L/h，150 L/h；碰撞气为氩气（纯度>99.999%），流速为0.15 mL/min。