[发明专利]一种质谱用交联剂及其制备与应用

权利要求书

1.一种质谱用交联剂，其特征在于，所述交联剂为：

式(I)化合物

2.一种质谱用交联剂的制备方法，用于制备权利要求1所述的质谱用交联剂，其特征在于，所述方法至少包括以下步骤：

以双(乙烯砜基)丙醇为起始物，在磷酸化试剂和碱的作用下，反应得到所述质谱用交联剂。

3.如权利要求2所述的质谱用交联剂的制备方法，其特征在于，所述方法至少包括以下步骤：

将双(乙烯砜基)丙醇溶于溶剂中，加入碱，冷却后加入磷酸化试剂，进行反应，纯化后得到所述质谱用交联剂。

4.如权利要求2或3所述的质谱用交联剂的制备方法，其特征在于，还包括以下特征中的一项或多项：

1)所述磷酸化试剂选自三氯氧磷、磷酸或其他磷酸酯中的一种或多种；

2)所述碱选自有机碱和/或无机碱；

3)反应温度为0℃-45℃；

4)所述双(乙烯砜基)丙醇：磷酸化试剂：碱的摩尔比为1:(2-6):(1.5-4.5)。

5.如权利要求4所述的质谱用交联剂的制备方法，其特征在于，特征2)中，所述有机碱选自吡啶，三乙胺，二异丙基乙基胺，三乙烯二胺，1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯，丁基锂，N-甲基吗啉，甲醇钠和叔丁醇钾中的一种或多种，和/或，所述无机碱选自氢氧化钠或氢氧化钾。

6.如权利要求1所述的质谱用交联剂在蛋白质交联中的用途。

7.一种研究蛋白质结构或蛋白质相互作用的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

将权利要求1所述的质谱用交联剂加入至蛋白质样品中，在缓冲液中反应。

8.如权利要求7所述的研究蛋白质结构或蛋白质相互作用的方法，其特征在于，还包括以下特征中的一项或多项：

1)所述缓冲液选自磷酸盐缓冲液或其它不与交联剂反应的缓冲液；

2)所述交联剂与蛋白质样品的摩尔比为1：(20-100)。

9.如权利要求7所述的研究蛋白质结构或蛋白质相互作用的方法，其特征在于，蛋白质交联后进行处理，至少包括以下步骤：

1)向交联后的蛋白质样品中加入还原剂进行还原；

2)加入烷基化试剂，将自由的巯基反应的活性封闭；

3)对所述蛋白质样品进行酶解，得到被交联剂修饰的多肽。

10.如权利要求9所述的研究蛋白质结构或蛋白质相互作用的方法，其特征在于，还包括以下特征中的一项或多项：

1)步骤1)中，进行还原前先除去尚未反应的交联剂小分子；

2)步骤1)中，所述还原剂选自二硫苏糖醇；

3)步骤2)中，所述烷基化试剂选自吲哚乙酸；

4)步骤3)中，采用胰蛋白酶进行酶解。