[发明专利]一种酪氨酸酶荧光生物传感器及其检测莠去津的方法在审
申请号: | 201910086975.3 | 申请日: | 2019-01-29 |
公开(公告)号: | CN109781685A | 公开(公告)日: | 2019-05-21 |
发明(设计)人: | 王鹏;王冬伟;周志强;刘东晖 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 北京迎硕知识产权代理事务所(普通合伙) 11512 | 代理人: | 钱扬保;张群峰 |
地址: | 100081 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 酪氨酸酶 莠去津 荧光生物传感器 氮掺杂石墨烯 多巴胺 量子点 检测 灵敏 荧光分光光度计 生物传感器 荧光光谱法 荧光光谱仪 催化底物 定量分析 定量检测 色谱分析 荧光探针 传统的 | ||
1.一种酪氨酸酶荧光生物传感器,其特征在于,由氮掺杂石墨烯量子点、酪氨酸酶和多巴胺组成,其中氮掺杂石墨烯量子点作为荧光探针,多巴胺作为催化底物。
2.根据权利要求1所述的酪氨酸酶荧光生物传感器,其中,所述氮掺杂石墨烯量子点通过以下步骤制得:柠檬酸和氨水在高压反应釜中加热反应后,冷却至室温加入超纯水稀释,加热除去多余氨,冷却后加入超纯水稀释,再经离心后,取上清液即为氮掺杂石墨烯量子点。
3.一种检测莠去津的方法,包括以下步骤:
(1)提供如权利要求1-2任一所述的酪氨酸酶荧光生物传感器;
(2)配置一系列浓度的莠去津标准液,分别加入到酪氨酸酶磷酸盐缓冲溶液中,混合静置后,加入氮掺杂石墨烯量子点水溶液与多巴胺水溶液,并用磷酸盐缓冲液稀释;
(3)使用荧光光谱仪分别测定步骤(2)所得溶液的荧光强度Fa,经线性拟合后得到标准方程;
(4)将待检测样品液加入到酪氨酸酶磷酸盐缓冲溶液中,混合静置后,加入氮掺杂石墨烯量子点水溶液与多巴胺水溶液,并用磷酸盐缓冲液稀释振荡一定时间后,采用荧光光谱仪检测荧光强度,与标准方程比对后得出样品液中莠去津的含量。
4.根据权利要求3所述的方法,其中,步骤(3)中还包括检测不含莠去津的酪氨酸酶磷酸盐缓冲溶液、氮掺杂石墨烯量子点水溶液与多巴胺水溶液三种混合后的荧光强度F0,检测单独的氮掺杂石墨烯量子点水溶液的荧光强度F,对测得的荧光强度数据进行处理,得到莠去津对酪氨酸酶活性抑制率(IE,%)数据,抑制率(IE)的计算方法如下:
以莠去津浓度对数与抑制率之间的对应关系建立标准方程。
5.根据权利要求4所述的方法,荧光光谱仪检测荧光强度的激发波长为355nm,发射波长为435nm。
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