[发明专利]具有Fc突变体的抗体与效应细胞的组合、用途和制法

权利要求书

1.一种具有Fc突变体的靶向肿瘤抗原的抗体和效应细胞的组合，其特征在于，所述效应细胞为体外诱导扩增的NKT细胞；所述Fc突变体具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，并且所述具有Fc突变体的靶向肿瘤抗原的抗体为抗EGFR抗体，其包含SEQ ID NO:8所示的重链和SEQ ID NO:10所示的轻链。

2.根据权利要求1所述的组合，其中，所述Fc突变体的编码核苷酸序列具有如SEQ IDNO:2所示的核苷酸序列。

3.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

具有Fc突变体的靶向肿瘤抗原的抗体和效应细胞；

其中，所述效应细胞为体外诱导扩增的NKT细胞；

所述Fc突变体具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；和

所述具有Fc突变体的靶向肿瘤抗原的抗体为抗EGFR抗体，其包含SEQ ID NO:8所示的重链和SEQ ID NO:10所示的轻链。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述Fc突变体的编码核苷酸序列具有如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。

5.根据权利要求1或2所述的组合或权利要求3或4所述的试剂盒在制备用于治疗肺癌的药物中的用途。

6.一种制备权利要求1或2所述的组合或权利要求3或4所述的试剂盒的方法，所述方法包括以下步骤：

1)制备具有Fc突变体的抗EGFR抗体，其中所述Fc突变体具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，所述抗EGFR抗体包含SEQ ID NO:8所示的重链和SEQ ID NO:10所示的轻链；和

2)体外扩增表达CD16的效应细胞；

其中，所述效应细胞为NKT细胞，所述NKT细胞通过包括以下步骤的方法培养：

①特异性扩增I型NKT细胞；

使用α-半乳糖苷神经酰胺(α-GalCer)扩增Ⅰ型NKT细胞，并以荷载α-半乳糖苷神经酰胺的CD1d表达细胞刺激Ⅰ型NKT细胞增殖，同时加入细胞因子IL-2和IL-7辅助Ⅰ型NKT细胞生长；

②进一步进行Ⅰ型NKT细胞数量扩增与引导功能定向分化；

其中，以荷载α-半乳糖苷神经酰胺的CD1d表达细胞刺激Ⅰ型NKT细胞增殖，同时加入IL-2、IL-7与IL-15，培养结束前1-2天，在培养体系中加入IL-12以引导Ⅰ型NKT细胞定向分化；

其中，所述CD1d表达细胞选自树突状细胞。