[发明专利]一种纳米抗体、以该纳米抗体为配基的吸附剂及其用途

说明书

本发明公开一种纳米抗体、以及以该纳米抗体为配基的吸附剂及其用途，其中，该纳米抗体的氨基酸序列包含互补决定区和框架区，在该互补决定区中，互补决定区1(CDR1)的氨基酸序列为SEQ ID NO:1，互补决定区2(CDR2)的氨基酸序列为SEQ ID NO:2，互补决定区3(CDR3)的氨基酸序列为SEQ ID NO:3。本发明的纳米抗体、以及以该纳米抗体为配基的吸附剂，对抗原有特异性识别，从而有效去除血液中不良炎症介质，实现良好的血液净化效果。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种基于纳米抗体的免疫亲和材料，特别是涉及一种纳米抗体、以该纳米抗体为配基的吸附剂及其用途。该吸附剂包括载体基质和作为配基的纳米抗体，该材料以特异性识别例如TNF-α的纳米抗体为配基，可以通过血液净化方式降低患者体内过量的TNF-α水平，从而缓解和/或治疗脓毒血症等疾病。

背景技术

肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)是一种能够诱导人体肿瘤细胞发生坏死的细胞因子。它是由3条相同多肽链组成的三聚物结构，可与TNF受体(TNF-R)相结合，从而介导多种生物学过程。其中，TNF-R存在于多种正常及肿瘤细胞表面，与TNF结合后介导下游信号传递的机理尚不清楚，可能与活化蛋白激酶C(PKC)，催化受体蛋白磷酸化有关。

由于产生的细胞不同，TNF可分为TNF-α和TNF-β两种。其中，TNF-α主要来源于单核细胞和巨噬细胞，其组成同源三聚体的每个亚基分子量为17kDa。

TNF-α作为一种炎症介质，对人体的作用具有双重性：在正常情况下，TNF-α对机体呈现保护性反应，可以参与抵抗细菌、病毒和寄生虫的感染过程，促进组织修复，引起肿瘤细胞凋亡，通过炎症反应清除体内致病因子，对于维持体内环境的稳定及组织的更新起着重要的调节作用。但在某些疾病(如脓毒症、类风湿关节炎)发生发展的过程中，其过高的血液浓度会导致激化的炎症反应，对病人机体组织造成不可逆的损伤。研究人员发现尿毒症患者体内TNF-α的最大浓度可达408ng/L，约为正常人体内TNF-α水平的40倍。此外，TNF-α在动物和人体脓毒症发病过程中，会增强巨噬细胞的激活和分化，释放其他促炎因子(如IL-6,IL-8和MIF)、脂质分子、反应性氧自由基和氮自由基，从而放大炎症级联反应，诱发器官功能障碍。

在类风湿关节炎(RA)患者体内，TNF-α可增加机体分泌和合成趋化因子及细胞黏附分子的表达，从而使淋巴细胞和单核细胞募集速率增加。TNF-α也可刺激抗原表达肌球蛋白重链(MHC)族Ⅱ型受体的表达，诱导滑膜成纤维细胞和软骨细胞产生前列腺素E2(PGE2)和基质金属蛋白酶(MMP)(胶原酶和基质蛋白酶)，从而导致滑膜炎症和增生，软骨组织破坏(参照非专利文献1)。

除了上述疾病，TNF-α还被发现与多种恶性肿瘤、炎性肠病(IBD)、2型糖尿病(T2D)、克罗恩疾病、免疫抑制性疾病和多发硬化性疾病的发病机制关系密切。因此，通过不同途径降低患者血液循环中过量的TNF-α或中和其活性对于相关疾病的预防、缓解、治疗以及减少并发症具有重要意义。

针对TNF-α进行治疗的方式主要有以下两种：一种是通过抗体药物抑制机体内TNF-α或者TNF-α受体的活性，阻断TNF-α发挥作用；另一种是采用血液净化的方式直接吸附去除患者血液中的TNF-α。