[发明专利]用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条及其制备方法在审
| 申请号: | 201910083128.1 | 申请日: | 2019-01-30 |
| 公开(公告)号: | CN110470843A | 公开(公告)日: | 2019-11-19 |
| 发明(设计)人: | 李彬;王青;王怀颖;金川;王寅 | 申请(专利权)人: | 公安部第一研究所;北京中天锋安全防护技术有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/558 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 100072 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 硝酸纤维素膜 量子点荧光免疫 层析试纸条 毒品检测 包被 毒品分子 检测区 控制区 吸水纸 底衬 偶联 制备 羊抗兔多克隆抗体 量子点标记抗体 羊抗兔多抗 应用范围广 释放 结合垫 灵敏度 试剂条 样品垫 荧光 粘设 粘贴 组装 检测 | ||
1.用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条,其特征在于,包括底衬,在底衬上粘贴有硝酸纤维素膜,所述硝酸纤维素膜的外表面的一侧粘设释放垫和样品垫,所述硝酸纤维素膜的外表面的另一侧粘设有吸水纸,硝酸纤维素膜设有靠近释放垫的检测区和靠近吸水纸的控制区,检测区包被BSA偶联毒品分子,控制区包被羊抗兔多克隆抗体。
2.根据权利要求1所述的用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条,其特征在于,释放垫喷涂量子点荧光颗粒标记的毒品检测鼠单克隆抗体。
3.用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、量子点标记抗体和荧光结合垫制备
(1)将100μl的浓度为10M羧基量子点加入到反应器中,补充400μl硼酸盐缓冲液,搅拌均匀后得到混合液,然后进入步骤(2);
(2)向步骤(1)得到的混合液中分别加入20μl待标记的浓度为1mg/ml的毒品抗体分子,低速搅拌均匀后形成混合液,然后进入步骤(3);
(3)向步骤(2)得到的混合液中加入25μl活化剂EDC,继续室温反应2h,反应结束后,8000rpm离心3min,除去可能出现的团聚沉淀物,留上清液,然后进入步骤(4);
(4)用超滤管将步骤(3)得到的上清液浓缩纯化5次得到包含量子点标记毒品抗体分子的终产物,每次浓缩比不小于10,然后将包含量子点标记毒品抗体分子终产物复溶于5ml浓度为0.05mol/L硼酸钠缓冲液中得到混合液;
(5)将步骤(4)得到的混合液以0.1~0.3ml/cm的用量喷到释放垫上,37摄氏度烘箱干燥24h,封袋,备用;
S2、BSA偶联毒品分子及羊抗兔多抗包被硝酸纤维素膜
分别将BSA偶联毒品分子、羊抗兔多克隆抗体用浓度为0.05mol/L硼酸钠缓冲液稀释至浓度为0.03~0.3mg/mL,然后以1ml/cm的用量分别喷到硝酸纤维素膜上的检测区和控制区,45℃烘干处理12h,封袋,备用;
S3、试剂条组装
在底衬上依次相互搭接地粘贴硝酸纤维素膜、样品垫、释放垫以及吸水纸,得到试纸板,按照要求切割成宽度为3.78~4mm的试纸条。
4.根据权利要求3所述的用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条的制备方法,其特征在于,步骤(1)中的硼酸盐缓冲液的配置方法为:将硼酸1.2368g、氯化钠0.2925g加入容器中,再加入蒸馏水,定容置100ml,搅拌均匀后即可。
5.根据权利要求3所述的用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条的制备方法,其特征在于,步骤(2)中的毒品抗体分子为吗啡抗体分子或甲基苯丙胺抗体分子或氯胺酮抗体分子。
6.根据权利要求3所述的用于毒品检测的量子点荧光免疫层析试纸条的制备方法,其特征在于,步骤(5)中的释放垫为聚酯膜荧光释放垫。
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