[发明专利]一种繁育蓝莓专一性共生菌根真菌的装置及方法有效
申请号: | 201910082637.2 | 申请日: | 2019-01-28 |
公开(公告)号: | CN109845516B | 公开(公告)日: | 2021-02-02 |
发明(设计)人: | 陈志远;秦公伟 | 申请(专利权)人: | 陕西理工大学 |
主分类号: | A01G7/06 | 分类号: | A01G7/06;A01G24/15;A01G24/30;A01G24/40;A01G31/00;A01G31/02 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 苗艳荣 |
地址: | 723000 陕西省汉中市汉*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 繁育 蓝莓 专一性 共生 菌根 真菌 装置 方法 | ||
1.一种繁育蓝莓专一性共生菌根真菌的装置,其特征在于,包括壳体(1),所述的壳体(1)内底部铺设有珍珠岩(4),所述的珍珠岩(4)上设置有脱脂棉(3),所述的脱脂棉(3)内设置有定植小穴,所述的定植小穴内放置有蓝莓组培苗或苔藓苗,在蓝莓组培苗或苔藓苗的侧方,设置有孢子转接液(2);
所述的珍珠岩(4)的铺设厚度为5-10mm,珍珠岩(4)在使用前需高压灭菌处理;
所述的珍珠岩(4)浸泡在pH为5.0的WPM液体培养基内,所述的WPM液体培养基高出珍珠岩(4)覆盖层10mm。
2.根据权利要求1所述的一种繁育蓝莓专一性共生菌根真菌的装置,其特征在于,所述的组培苗直接移入定植小穴中,所述的苔藓苗经灭菌处理后移入定植小穴中。
3.一种繁育蓝莓专一性共生菌根真菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)培养瓶底部预先装入5-10mm厚粒径为0.5-1mm的珍珠岩,高压灭菌处理后,将pH为5.0的WPM液体培养基倒入培养瓶中,覆盖珍珠岩层;
2)在无菌操作环境下,取经过高压灭菌处理过的松散脱脂棉,在中间部位抠出定植小穴,将蓝莓组培苗或苔藓苗在萘乙酸与吲哚丁酸混合液中浸泡1min后,植入定植小穴并压紧脱脂棉;
3)将包裹有脱脂棉的蓝莓苗移入培养瓶,在蓝莓苗毛细根系周边等距滴加5-8滴共生菌根孢子转接液;
4)封闭培养瓶,光照温室中培养2周,待菌根真菌随蓝莓根系长满脱脂棉后,无菌条件下取出培养瓶中脱脂棉,用剪刀剪成小碎团,无菌袋中密封;大田中作为菌肥接种使用时,将脱脂棉小碎团直接埋入蓝莓根系周边即可;研究使用时,取1个脱脂棉小碎团,用无菌水冲洗,滤纸过滤即可得到菌根孢子。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(2)中所述的萘乙酸和吲哚丁酸的浓度为300μg/L。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(3)中所述的孢子转接液为:将质量百分比为95%的植物食用油、3%的吐温80、2%的吐温20混匀并灭菌处理后备后,加入共生菌根的孢子并混匀,每滴孢子转接液中混入的孢子数量不低于50个。
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