[发明专利]一种月季新品种‘燕京粉’及其诱导与培养方法

权利要求书

1.一种月季新品种‘燕京粉’诱导与培养方法，其特征在于，所述一种月季新品种‘燕京粉’诱导与培养方法包括：

步骤一，取二倍体月季“月月粉”茎段在MS培养基上进行快繁；

步骤二，将组培苗在无菌条件下切成3mm的带芽茎段，在浓度为1000mg/L的秋水仙素中培养24h；

步骤三，将处理过的茎段用无菌水冲洗干净，接种在MS增殖培养基上，每瓶接种3～4个茎段，培养50d后统计存活率和诱导率；

步骤四，分析植株形态；

步骤五，利用流式细胞术鉴定植株倍性；

步骤六，植株倍性的压片法鉴定；

步骤七，将倍性为四倍体的无根苗继代多次后置于1/2MS培养基中诱导生根；生根后炼苗，获得同源四倍体植株“燕京粉”，再进行栽培管理；

步骤三中，MS增殖培养基为NH₄NO₃ 1650mg/L，KNO₃ 1900mg/L，CaCl₂·2H₂O 440mg/L，MgSO₄·7H₂O 370mg/L，KH₂PO₄ 170mg/L，KI 0.83mg/L，H₃BO₃ 6.2mg/L，MnSO₄·4H₂O 22.3mg/L，ZnSO₄·7H₂O 8.6mg/L，Na₂MnO₄·2H₂O 0.25mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.025mg/L，CoCl₂·6H₂O0.025mg/L，FeSO₄·7H₂O 27.8mg/L，Na₂-EDTA·2H₂O 37.3mg/L，肌醇100mg/L，烟酸0.5mg/L，盐酸吡哆醇0.5mg/L，盐酸硫胺素0.1mg/L，甘氨酸2mg/L，0.7％琼脂，3％蔗糖，1.5mg/L6-BA，0.05mg/L NAA；

步骤七中，1/2MS培养基由以下成分组成：NH₄NO₃ 825mg/L，KNO₃ 950mg/L，CaCl₂·2H₂O220mg/L，MgSO₄·7H₂O 185mg/L，KH₂PO₄ 85mg/L，KI 0.83mg/L，H₃BO₃ 6.2mg/L，MnSO₄·4H₂O22.3mg/L，ZnSO₄·7H₂O 8.6mg/L，Na₂MnO₄·2H₂O 0.25mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.025mg/L，CoCl₂·6H₂O 0.025mg/L，FeSO₄·7H₂O 27.8mg/L，Na₂-EDTA·2H₂O 37.3mg/L，肌醇100mg/L，烟酸0.5mg/L，盐酸吡哆醇0.5mg/L，盐酸硫胺素0.1mg/L，甘氨酸2mg/L，0.7％琼脂，4％蔗糖。

2.如权利要求1所述的月季新品种的诱导与培养方法，其特征在于，步骤五中，流式细胞术鉴定植株倍性的方法包括：

在茎段培养70d后，从样品组培苗上切下新生长的幼嫩叶，使用流式细胞仪检测培养材料的倍性。

3.如权利要求1所述的月季新品种的诱导与培养方法，其特征在于，步骤六中，植株倍性的压片鉴定方法包括：

取培养材料的茎尖用0.002mol/L 8-羟基喹啉处理4h，蒸馏水洗净后放入3:1的乙醇：冰醋酸中固定2h，用蒸馏水洗去固定液，加入6 mol/L的HCl溶液，离析10min,蒸馏水冲洗数次；将茎尖置于载玻片上，苯酚品红染液染色5min，盖上盖玻片，吸水纸吸去多余染液，再垂直轻敲后统计染色体数目。