[发明专利]一种稀有人参皂苷的转化方法

权利要求书

1.一种稀有人参皂苷制备方法，其特征在于，

所述制备方法包括如下步骤：

(1)配制反胶团溶剂体系的有机相，将水解酶包裹于反胶团溶剂体系中，配制含水的流动相，加入底物样品；

(2)将含有酶的反胶团溶剂泵入逆流色谱仪，调整好仪器参数，空白流动相泵入，并达到流体动力学平衡；

(3)将加入底物的流动相泵入逆流色谱仪，并进行酶解反应，出口端收集产物稀有人参皂苷样品溶液；

(4)将上述样品溶液浓缩、干燥、水溶解除去增溶剂，样品烘箱干燥，即得稀有人参皂苷样品；

所述步骤(1)中的反胶团溶剂体系为丁二酸二异辛酯磺酸钠/曲拉通X-100/异辛烷体系。

2.如权利要求1所述的稀有人参皂苷制备方法，其特征在于，步骤(1)包括以下步骤：取丁二酸二异辛酯磺酸钠，曲拉通X-100，用异辛烷溶解，定容，配制丁二酸二异辛酯磺酸钠/曲拉通X-100/异辛烷溶液；用磷酸-磷酸二氢钾缓冲液配水解酶溶液，在丁二酸二异辛酯磺酸钠/曲拉通X-100/异辛烷反胶束体系中加入水解酶溶液以配制酶-反胶团体系。

3.如权利要求1所述的稀有人参皂苷制备方法，其特征在于，所述丁二酸二异辛酯磺酸钠/曲拉通X-100/异辛烷溶液的总表面活性剂浓度为0.08～0.12mol/L。

4.如权利要求1所述的稀有人参皂苷制备方法，其特征在于，所述水解酶溶液的浓度40～60μmol/L。

5.如权利要求2所述的稀有人参皂苷制备方法，其特征在于，所述酶-反胶团体系用磷酸-磷酸二氢钾缓冲液进行饱和分配，分取上下相，上相为含有酶液的固定相，下相加入人参皂苷底物，保留部分空白下相溶液作为初始空白流动相。

6.如权利要求5所述的稀有人参皂苷制备方法，其特征在于，所述磷酸-磷酸二氢钾缓冲液pH值为4.8～5.2。

7.如权利要求1所述的稀有人参皂苷制备方法，其特征在于，所述水解酶为蜗牛酶、β-葡萄糖苷酶、β-乳糖苷酶中的一种或几种的混合物。

8.如权利要求1所述的稀有人参皂苷制备方法，其特征在于，步骤(2)的操作如下：将反胶团酶溶液自首端泵入逆流色谱分离柱，顺时针方向旋转，调节转速，将空白流动相自尾端进入逆流色谱分离柱，当两相溶剂系统达到流体动力学平衡后，泵入含有人参皂苷底物的流动相溶液，开启检测器，设置分离比，收集流出液。

9.如权利要求8所述的稀有人参皂苷制备方法，其特征在于，所述反胶团酶溶液以25～35mL/min流速泵入。

10.如权利要求8所述的稀有人参皂苷制备方法，其特征在于，调节转速至750～850rmp。

11.如权利要求1所述的稀有人参皂苷制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中加入底物的流动相以0.8～4.0mL/min流速进行酶解反应。