[发明专利]重编程产生功能性去甲肾上腺素能神经元的方法有效
申请号: | 201910072527.8 | 申请日: | 2019-01-25 |
公开(公告)号: | CN111484977B | 公开(公告)日: | 2023-05-16 |
发明(设计)人: | 程乐平;李三兰;饶志萍;石玉含;刘月光;袁嘉成 | 申请(专利权)人: | 中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12Q1/02;A61K35/30;A61P25/00;A61L27/38 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 陈静 |
地址: | 200031 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 编程 产生 功能 去甲肾上腺素 神经元 方法 | ||
1.一种产生去甲肾上腺素能神经元的方法,包括在非神经元细胞中表达外源的以下转录因子:
Ascl1,Phox2b,Gata3,Hand2;以及
选自AP-2α和Nurr1之一或两种;
其中,所述Gata3、AP-2α还包括同源物或类似物;所述的Gata3的同源物或类似物为Gata2;所述的AP-2α的同源物或类似物为AP-2β。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,还在细胞中表达外源的以下转录因子:Phox2a。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的非神经元细胞为体细胞。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的体细胞包括:成纤维细胞,星形胶质细胞,上皮细胞,血液细胞。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在非神经元细胞中表达所述外源的转录因子的方法是:
(a) 提供细胞;
(b) 用表达载体将所述的转录因子转入(a)的细胞中,或通过蛋白转染将所述的转录因子转入(a)的细胞中;
(c) 培养(b)获得的细胞。
6.一种去甲肾上腺素能神经元或其培养物,其由权利要求1-5任一所述的方法获得。
7.如权利要求6所述的去甲肾上腺素能神经元或其培养物,其特征在于,所述去甲肾上腺素能神经元具有如下一种或多种性能:
1) 释放去甲肾上腺素;
2) 表达去甲肾上腺素能神经元的标志分子
3) 表达去甲肾上腺素能神经元的标志分子
4)表达去甲肾上腺素能神经元的标志分子
5) 表达去甲肾上腺素能神经元的标志分子
6) 具备神经元的基本电生理特征,包括:膜阻抗、静息膜电位、在去极化的刺激下能够产生动作电位,并且能够记录到由于钠通道开放而产生的钠电流,能够接受其他细胞的输入并产生输出;
7) 能够与靶细胞或者靶器官建立突触联系并支配其活动。
8. 权利要求6或7所述的去甲肾上腺素能神经元或其培养物的用途,用于:
制备预防或治疗神经系统疾病的药物;或
作为体外模型,进行神经系统疾病的模拟及其药物的筛选;或
制备体内细胞移植的组合物。
9.一种组合物,其特征在于,所述组合物含有:权利要求6或7所述的去甲肾上腺素能神经元或其培养物,以及药学上可接受的载体。
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