[发明专利]重编程产生功能性去甲肾上腺素能神经元的方法有效

专利信息
申请号: 201910072527.8 申请日: 2019-01-25
公开(公告)号: CN111484977B 公开(公告)日: 2023-05-16
发明(设计)人: 程乐平;李三兰;饶志萍;石玉含;刘月光;袁嘉成 申请(专利权)人: 中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心
主分类号: C12N5/10 分类号: C12N5/10;C12Q1/02;A61K35/30;A61P25/00;A61L27/38
代理公司: 上海专利商标事务所有限公司 31100 代理人: 陈静
地址: 200031 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 编程 产生 功能 去甲肾上腺素 神经元 方法
【权利要求书】:

1.一种产生去甲肾上腺素能神经元的方法,包括在非神经元细胞中表达外源的以下转录因子:

Ascl1,Phox2b,Gata3,Hand2;以及

选自AP-2α和Nurr1之一或两种;

其中,所述Gata3、AP-2α还包括同源物或类似物;所述的Gata3的同源物或类似物为Gata2;所述的AP-2α的同源物或类似物为AP-2β。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,还在细胞中表达外源的以下转录因子:Phox2a。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的非神经元细胞为体细胞。

4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的体细胞包括:成纤维细胞,星形胶质细胞,上皮细胞,血液细胞。

5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在非神经元细胞中表达所述外源的转录因子的方法是:

(a) 提供细胞;

(b) 用表达载体将所述的转录因子转入(a)的细胞中,或通过蛋白转染将所述的转录因子转入(a)的细胞中;

(c) 培养(b)获得的细胞。

6.一种去甲肾上腺素能神经元或其培养物,其由权利要求1-5任一所述的方法获得。

7.如权利要求6所述的去甲肾上腺素能神经元或其培养物,其特征在于,所述去甲肾上腺素能神经元具有如下一种或多种性能:

1) 释放去甲肾上腺素;

2) 表达去甲肾上腺素能神经元的标志分子DbhTh

3) 表达去甲肾上腺素能神经元的标志分子DdcVmat2Slc6a2GalaninNpyHtr3aRet

4)表达去甲肾上腺素能神经元的标志分子ThDbhVmat2ddcNetMap2NpyGalRet

5) 表达去甲肾上腺素能神经元的标志分子Synapsin IDdcVmat2NetGalaninNpy

6) 具备神经元的基本电生理特征,包括:膜阻抗、静息膜电位、在去极化的刺激下能够产生动作电位,并且能够记录到由于钠通道开放而产生的钠电流,能够接受其他细胞的输入并产生输出;

7) 能够与靶细胞或者靶器官建立突触联系并支配其活动。

8. 权利要求6或7所述的去甲肾上腺素能神经元或其培养物的用途,用于:

制备预防或治疗神经系统疾病的药物;或

作为体外模型,进行神经系统疾病的模拟及其药物的筛选;或

制备体内细胞移植的组合物。

9.一种组合物,其特征在于,所述组合物含有:权利要求6或7所述的去甲肾上腺素能神经元或其培养物,以及药学上可接受的载体。

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