[发明专利]一种脂蛋白(a)的测定试剂盒

说明书

本发明提供了一种脂蛋白(a)的测定试剂盒，涉及医学生物检测技术领域。该试剂盒包括试剂R1、R2、校准品和质控品。试剂R1包括三羟甲基氨基甲烷、氯化钠、聚乙二醇‑6000、生物防腐剂和表面活性剂；试剂R2包括三羟甲基氨基甲烷、羊抗人脂蛋白(a)抗体胶乳颗粒、二丁基甲基甲苯、甘氨酸、硫酸葡聚糖、生物防腐剂和表面活性剂。该试剂盒采用了胶乳免疫比浊法，使用混合粒径的胶乳试剂，可使用全自动生化分析仪同时对大量样本进行检测，线性好，提高了检测灵敏度、准确度、精密度，缩短了检测时间，操作简单，经济成本较低，且存储时间更长。

技术领域

本发明涉及医学生物检测技术领域，具体涉及一种脂蛋白(a)的测定试剂盒。

背景技术

脂蛋白(a)(lipoprotein(a)，Lp(a))是一种特殊独立的血浆脂蛋白，核心部分为中性脂质和apoB-100分子，其外围包绕着亲水性的apoa，二者以二硫键共价连接；其中apoa是脂蛋白(a)的特征性糖蛋白成分，主要由一种称为Kringle的特征性结构构成，Kringle由80-114个氨基酸残基组成，依靠三个内部二硫键稳定，是1963年挪威遗传学家Berg在研究低密度脂蛋白的遗传学变异时发现的。主要在肝脏合成后分泌入血，在致动脉粥样硬化过程中起着极其重要的作用。脂蛋白(a)与冠心病、钙化性主动脉瓣狭窄、家族性高胆固醇血症、外周血管疾病等密切相关，并已成为公认的冠心病独立预测因子。

目前，检测脂蛋白(a)的检测方法有放射免疫法、酶联免疫吸附法、免疫比浊法，但是放射免疫法有放射性污染，酶联免疫吸附法操作复杂、耗时长，对操作者有一定的技能要求，免疫比浊法与纤溶酶原有交叉污染，因此测定的准确度也就比较低，需要进行改进。胶乳颗粒增强比浊法(particle-enhanced turbidimetric immunoassay，PETIA)是近年来出现的一种较为稳定、准确的体液蛋白均相免疫比浊检测方法。在高分子胶乳微球的表面交联单克隆抗体，当交联有抗体的微球与抗原结合后，在短时间内会迅速聚集在一起，改变了反应液的散光性能或透光性能。反应液透光性能(即吸光度)的改变与被测抗原的浓度有较强的相关性，在一定范围内可以反映被测抗原的浓度。PETIA检测方法的简便快速，灵敏度高，能更有效地避免许多外界因素的干扰，稳定性和重复性都较好，能较真实地反映被测物质的含量。

目前，中国专利公布CN106501536A公开了一种胶乳定向偶联技术检测脂蛋白(a)的试剂盒，运用抗体定向偶联技术处理脂蛋白(a)单克隆抗体胶乳微球，该试剂盒包括试剂1与试剂2，试剂R1：PBS缓冲液(PH7.0)20-100mmol/L、聚乙二醇8000(PEG 8000)10-30g/L、叠氮钠0.05％；试剂R2：PBS缓冲液(PH7.0)20-100mmol/L、抗人脂蛋白(a)胶乳微球10-15mg/mL、EDTA0.3-0.6g/L、蔗糖25-60mmol/L、叠氮钠0.05％，该试剂盒可保存6个月以上，其检测结果准确度相对偏差≥3.56％，精密度CV≥2.25％，线性相关系数小于r²≤0.9971。中国专利公布CN106093407A公开了一种测定脂蛋白(a)的试剂盒及其制备方法，该试剂盒包括试剂R1和试剂R2，试剂R1包括缓冲液、稳定剂、加速剂、防腐剂、抗人类风湿因子抗体，试剂R2包括缓冲液、表面活性剂、稳定剂、助悬剂、防腐剂、胶乳包被抗人脂蛋白(a)抗体。其检测结果准确度较高，相对偏差≥0.66％，精密度CV≥2.63％。

目前市面上已知的检测血清脂蛋白(a)的试剂盒较少，且存在较大的缺陷，如灵敏度不足、准确度和精密度较低、线性较差、保存时间较短、操作繁琐、成本昂贵等，均不利于临床推广使用。因此，亟需提供一种检测灵敏度、准确度和精密度高、线性好、保存时间长的脂蛋白(a)测定试剂盒。

发明内容

本发明的目的在于提供一种脂蛋白(a)的测定试剂盒及其检验方法。克服了现有技术中存在的问题，提高了测定结果的准确度和精密度等。

本发明一方面提供了一种脂蛋白(a)的测定试剂盒，所述的试剂盒包括：试剂R1、试剂R2、校准品和质控品；