[发明专利]记忆性淋巴细胞群在肝癌治疗中的应用有效
| 申请号: | 201910068937.5 | 申请日: | 2019-01-24 |
| 公开(公告)号: | CN109628396B | 公开(公告)日: | 2021-03-26 |
| 发明(设计)人: | 陈立功;孙忠杰;赵宏;蔡建强;马骏凡;郭潇;齐海龙;薛庆磊;张叔人 | 申请(专利权)人: | 清华大学;诺未科技(北京)有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 赵天月 |
| 地址: | 10008*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 记忆 淋巴细胞 肝癌 治疗 中的 应用 | ||
1.一种记忆性淋巴细胞群在制备治疗肝癌的药物中的用途,所述药物降低肿瘤转移复发风险,所述记忆性淋巴细胞群含有中央记忆性T细胞、效应记忆性T细胞、效应T细胞、NK细胞和NKT细胞,所述记忆性淋巴细胞群含有如下标志分子:白细胞分化抗原CD3、CD4、CD8、CD16、CD56、CD62L和CD45RO;
所述记忆性淋巴细胞群中主细胞群为中央记忆性T细胞,含量不低于70%,表面标志分子为CD3+CD45RA-CD45RO+CD62L+。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,表面标志分子为CD4+的所述中央记忆性T细胞中CD39+PD-1-细胞亚群的比例为5~8%;
表面标志分子为CD8+的所述中央记忆性T细胞中CD39+PD-1-细胞亚群的比例为35~45%。
3.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述记忆性淋巴细胞群与负载有肿瘤抗原的DC细胞接触后,所述记忆性淋巴细胞群中表面标志分子为CD62L+的细胞比例下降,表面标志分子为CD62L-细胞比例升高,IFN-γ表达量升高。
4.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述记忆性淋巴细胞群通过以下方法获得:
将初始免疫细胞重悬于培养基中进行培养,以便获得记忆性淋巴细胞群,
其中,所述培养基包括:
基础培养基;
白细胞介素-2;
白细胞介素-7;
白细胞介素-15;
Anti-CD3抗体;以及
自体血浆;
所述白细胞介素-2的浓度为5×104U/L~1×106U/L;
所述白细胞介素-7的浓度为1~60ng/mL;
所述白细胞介素-15的浓度为1~60ng/mL;
所述Anti-CD3抗体的浓度为0.5~10μg/mL;
所述自体血浆的浓度为1~10体积%;
所述基础培养基选自GT-T551培养基;
所述自体血浆是通过将外周血离心,收集上层液并在50~60℃灭活20~40分钟而获得的;
所述培养基的pH值为7.2~7.4。
5.根据权利要求4所述的用途,其特征在于,所述白细胞介素-2的浓度为5×105U/L;
所述白细胞介素-7的浓度为5ng/mL;
所述白细胞介素-15的浓度为5ng/mL;
所述Anti-CD3抗体的浓度为3μg/ml;
所述自体血浆的浓度为5体积%。
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