[发明专利]一种锦鸡儿芽增殖与植株再生的方法及其培养基

说明书

本发明提供了一种锦鸡儿芽增殖与植株再生的方法，通过材料准备、茎段腋芽诱导、芽继代增殖、生根培养、植株移栽等步骤，建立了锦鸡儿芽增殖与植株再生的方法，本方法为锦鸡儿的组织培养提供了稳定高效的快繁体系，有效保证了锦鸡儿组培体系的高生根率和存活率，为锦鸡儿快繁体系的扩大发展和推广种植提供了有力的技术保障。

发明领域

本发明涉及植物组织培养领域，具体为一种锦鸡儿芽增殖与植株再生的方法及其培 养基。

背景技术

锦鸡儿(Caragana sinica)又名金雀花、娘娘袜，是豆科锦鸡儿属灌木。主要分布于 我国山西、内蒙古、新疆、河北、河南、山东、陕西、甘肃、湖北、湖南、四川、吉林、辽 宁、黑龙江、江西等省、区。耐瘠薄,生于山坡,于石灰岩山地土层浅薄处也常见，常与杂 草及其他灌木混生。锦鸡儿具有食用、饲养、绿肥、薪碳、蜜源等资源价值，其根或根皮可 入药(中药名：金雀根)，富含的二苯乙烯类化合物具有多种活性，可促进成骨细胞增殖， 具有预防骨质疏松的功效。锦鸡儿植物是西部恢复生态的先锋树种，是防沙治沙发展畜牧业 的优选灌木植物，具有极高的生态价值、经济价值和药用价值。

锦鸡儿种子采集困难，其繁殖一般采取扦插、分株、压条等方法，繁殖系数低，时间周期长，生根困难，无法满足市场和科研需求。组织培养能短时间内获得大量苗木，且不受季节因素影响，可常年进行。目前，对于锦鸡儿及其同属植物组织培养方面的研究虽然已有一些，但缺少稳定高效的快繁体系，生根率及存活率较低。

发明内容

本发明的目的是提供一种克服现有技术不足，提出一种锦鸡儿芽增殖与植株再生的 方法及其培养基。

本发明的目的一是提供一种锦鸡儿芽增殖与植株再生的方法，具体包括如下步骤：

(1)材料准备：采取3～4年龄的锦鸡儿半木质化枝条为外植体，剪去叶片后消毒，将消 毒后的外植体剪成1.0～1.5cm长单节茎段备用。

(2)茎段腋芽诱导：将步骤(1)获得的茎段接种到芽诱导培养基中，置于透气瓶 中培养，培养间温度23-26℃，光照时间14h/d,光照强度约3000Lux，培养40d。芽诱导培 养基配方为：在MS培养基中加入6g.L^-1琼脂和30g.L^-1蔗糖,添加15uM 6-苄氨基腺嘌呤 (6-BA)和1uM萘乙酸(NAA)，pH值调整为5.8～6.0。

(3)芽继代增殖：将步骤(2)中诱导出的新生幼芽剪成0.5～1cm长的单节茎段， 接种到继代增殖培养基中，置于透气瓶中培养，培养间温度23-26℃，光照时间14h/d,光照 强度约3000Lux，培养30d。芽继代增殖培养基配方为：在MS培养基中加入6g.L^-1琼脂 和30g.L^-1蔗糖，添加5uM 6-BA、0.1uM NAA和2uM GA₃，pH值调整为5.8～6.0。

(4)生根培养：切取步骤(3)获得的3cm以上的健壮芽至MS培养基中，30d后接 种到生根培养基中，置于透气瓶中培养，培养条件为0.15％CO₂，培养温度20-25℃，光照 时间14h/d，光照强度3300Lux，RH 90％，培养30d。生根培养基配方为：在1/2MS中添 加6g.L^-1琼脂和10g.L^-1的蔗糖，pH值调整为5.8～6.0。

(5)将步骤(4)得到的生根的植株移栽到混合基质中，即珍珠岩：蛭石：腐质土 ＝1：1：3。

作为优选，所述锦鸡儿半木质化枝条为4-5月的新生枝条。

本发明的目的二是提供一套锦鸡儿芽增殖与植株再生的培养基，具体包括以下内容： (1)芽诱导培养基配方：在MS培养基中加入6g.L^-1琼脂和30g.L^-1蔗糖,添加15uM 6- BA和1uM NAA。