[发明专利]一种用于治疗扩张型心肌病的药物及其筛选、制备方法

说明书

本发明公开了一种用于治疗扩张型心肌病的药物及其筛选、制备方法，属于医药生物工程领域，所述药物的药效成分包括以kshv‑miR‑K12‑1‑5p为药物靶点，通过结合、降解、和/或下调表达所述kshv‑miR‑K12‑1‑5p的物质；本发明通过以kshv‑miR‑K12‑1‑5p为药物作用靶点、且下调表达kshv‑miR‑K12‑1‑5p分子能起到显著改善KSHV感染导致的内皮细胞间连接功能紊乱及其屏障作用的损伤，潜在改善心脏功能的作用。

技术领域

本发明涉及一种用于治疗扩张型心肌病的药物及其筛选、制备方法，尤其涉及一种获得性的病毒非编码小RNA的反义互补序列的新医药用途，更具体地说涉及一种非编码kshv-miR-K12-1-5p反义互补序列在治疗扩张型心肌病中的用途及含有该非编码kshv-miR-K12-1-5p反义互补序列的药物的筛选、制备方法，属于医药生物工程领域。

背景技术

慢性扩张型心肌病是不同的心血管疾病发展到终末阶段的临床综合征，主要病理生理特点为心室充盈和射血能力受损，最后导致心室泵血功能低下，其预后不良，死亡率高，是威胁人类健康和导致医疗负担增加的最主要病因之一，对于人口老龄化日益加重的中国来说尤为重要。扩张型心肌病在导致慢性扩张型心肌病的各种心血管疾病中排在第三位，而且是心脏移植手术的首要病因，扩张型心肌病是一种以心腔扩大、心肌收缩功能障碍为主要特征的原因不明的心肌疾病，至今尚无特异性治疗方法，预后极差，1年病死率在25％到30％之间，5年病死率达到50％左右。病毒感染在扩张型心肌病发病中起重要作用，这主要基于在扩张型心肌病病人的心脏组织中检测到某些病毒如柯萨奇B病毒(CoxsackieB virus，CVB)的核酸片段，但其致病机制尚未阐明。到目前为止，尚无针对病毒感染的方案用于扩张型心肌病的诊疗，因此急需寻找包含病毒感染因素在内的对于扩张型心肌病的风险评估和治疗方法。

微小RNA(microRNA，miRNA)是一类新发现的在多种生物进程中具有重要调控作用的非编码RNA，来源于内源性发夹结构转录本的长度大约为22个核苷酸的单链RNAs。通常miRNA作为引导分子，与靶mRNA的3’UTR碱基互补结合，介导基因转录后调控。与传统的单靶点药物治疗相比，miRNA治疗可以在单个核苷酸分子靶点治疗的情况下，从多个水平调控疾病病理生理状态，达到更有效的治疗效果。

大量研究表明miRNAs参与了多种多样的生理和病理生理过程调控，但大多聚焦于对机体内源性miRNAs的作用研究，对于外源性miRNA的研究相对较少。外源性miRNA主要指病原体感染后在机体内表达的miRNAs，又以病毒表达的miRNAs最为多见。目前已发现疱疹病毒、多瘤病毒、逆转录病毒等能够表达miRNAs，且病毒编码的miRNAs可将宿主的mRNA作为靶点，调节宿主基因的表达。然而，病毒表达的miRNA是否参与了病毒引起的疾病过程，具体通过何种机制产生作用，目前仍知之甚少。在慢性扩张型心肌病相关研究中，虽然已对患者外周血miRNAs表达谱进行过检测(Circulation.2014；129(9):1009-21；Proc Natl AcadSci U S A.2014；111(30):11151-6)，但病毒miRNAs与扩张型心肌病的关系尚未见报道，也未有以病毒miRNAs为药物靶点的治疗药物。

本发明中，申请人偶然地在扩张型心肌病患者外周血和心脏组织中发现了卡波西肉瘤相关病毒(Kaposi’s sarcoma-associated herpes virus,KSHV)表达的miRNA-kshv-miR-K12-1-5p存在表达，并通过流行病学统计方法证明KSHV感染及kshv-miR-K12-1-5p表达量与扩张型心肌病的发生存在相关性，并开发了以kshv-miR-K12-1-5p为靶点的治疗扩张型心肌病的药物，之后，通过细胞实验证实下调kshv-miR-K12-1-5p具有改善KSHV感染导致的内皮细胞间连接功能紊乱，潜在改善心脏功能的作用。

发明内容