[发明专利]一种间充质干细胞保存液、其制备方法及其应用

说明书

本发明实施例提供了一种间充质干细胞保存液、其制备方法及其应用，该间充质干细胞保存液包括有勃脉力A电解质注射液、胰岛素、雌激素、孕激素以及亚硒酸钠、肝素钙和人血白蛋白。由上述组分组成的保存液能够支持干细胞尤其是脐带间充质干细胞的生命状态，避免细胞活性快速下降甚至死亡，具有能够长时间保存干细胞的优点。

技术领域

本发明涉及干细胞制剂保存液技术领域，具体而言，涉及一种间充质干细胞保存液、其制备方法及其应用。

背景技术

间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSC)是中胚层来源的、具有高度自我更新能力和多向分化潜能的多能干细胞。事实上，MSC广泛存在于全身多种组织中，几乎来源于机体所有的组织器官，如骨髓、骨膜、脂肪组织、牙髓、滑膜、脐带、胎盘、羊水及胎儿组织等。

不同来源的间充质干细胞具有相似的形态，表达相同的表面标记，具有相似的生物学特性方面，如可在体外培养扩增，并能在特定条件下分化为包括神经细胞、成骨细胞、软骨细胞、肌肉细胞、脂肪细胞在内的多组织系统的细胞。MSC除了具有多向组织细胞分化能力之外，还在造血、免疫炎症反应、血管新生等人体重要功能中起重要调节作用。

脐带间充质干细胞(UC-MSC)是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞。脐带间充质是一类低免疫原性细胞，且具有很强的免疫调节功能。脐带间充质干细胞拥有MSC的全部特性，并且含量丰富，易于分离培养。

与其他来源的MSC相比，UC-MSC更原始，是介于胚胎干细胞和成体干细胞之间的干细胞，其增殖和分化能力比胚胎干细胞低，但明显高于成体干细胞。

脐带间充质干细胞具有多分化潜能，在特定的诱导条件下，UC-MSC不仅能分化为骨、软骨、脂肪、肌腱等中胚层细胞，而且能够向内胚层组织细胞(如心肌细胞、肝细胞)和外胚层组织细胞(如神经细胞)分化。UC-MSC不具致瘤性，能在不同的诱导条件及合适的体内生长微环境中，安全地定向分化为不同的组织细胞系，具有修复各种组织和器官的能力。

临床常用0.9％氯化钠注射液、5％葡萄糖注射液、1％人血白蛋白溶液与5％人血白蛋白溶液、复方电解质注射液作为脐带间充质干细胞的制剂保存液，但这些保存液在6h后，细胞活性已非常低，会引起治疗效果的严重下降。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种间充质干细胞保存液，其能够支持干细胞尤其是脐带间充质干细胞的生命状态，避免细胞活性快速下降甚至死亡，具有能够长时间保存干细胞的优点。

本发明的第二目的在于提供一种脐带间充质干细胞的保存方法，采用该保存方法能够长时间地维持干细胞，尤其是脐带间充质干细胞的活性。

本发明的第三目的在于提供一种间充质干细胞保存液的制备方法，该制备方法能够制备出具有长时间保存干细胞的保存液。

本发明的第四目的在于提供一种用于制备脐带间充质干细胞的试剂盒。

本发明的第五目的在于提供一种脐带间充质干细胞注射液。

本发明是这样实现的：

一种间充质干细胞保存液，其包括有勃脉力A电解质注射液、胰岛素、雌激素、孕激素、亚硒酸钠、肝素钙以及人血白蛋白。该保存液具有能够长时间维持干细胞生命状态的优点，能够避免由于缺氧、饥饿等原因引起的细胞损伤甚至细胞死亡。肝素钙可以有效降低细胞的聚集，减缓制剂后细胞结团过程。人血白蛋白能为细胞提供必需的营养组分，维持细胞的生理状态。

具体地，在该间充质干细胞保存液中，胰岛素的终浓度为0.1μg/L、0.15μg/L、0.2μg/L、0.25μg/L或0.3μg/L，在一些实施例中，胰岛素的终浓度可以在0.1～0.3μg/L的范围内选择；