[发明专利]一种圆柏花粉变应原浸提物、其浸液及其制备方法

说明书

本发明提供了本发明涉及一种圆柏花粉变应原浸提物、其浸液及其制备方法，该圆柏花粉变应原浸提物，其中含有圆柏花粉变应原蛋白如SEQ ID NO.4‑SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列。该浸提物的浸提液可由圆柏花粉收集、干燥、脱脂、提取、超滤浓缩、冷冻干燥、复溶等工艺方法制得。该圆柏花粉变应原浸提物具有特异性高的特点，圆柏致敏蛋白组分提取充分，总生物效价稳定，有效期长，无菌效果好；其浸提液可有效用于变态反应疾病的皮肤点刺试验诊断、经适当稀释后(10^‑2～10^‑20)可用于体外嗜碱性粒细胞活化试验诊断、皮内试验诊断及特异性免疫治疗，可有效诊断由圆柏花粉诱发的变态反应疾病并对其进行特异性免疫治疗。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种圆柏花粉标准化变应原浸液及其制备方法。

背景技术

人们对变态反应疾病的认识始于“花粉热”，花粉热又称过敏性鼻炎。1911年Noon和Freeman首次利用花粉提取液来治疗花粉热，变态原疾病治疗的历史从此开始。目前，变态反应性疾病是全球性重大卫生问题之一。工业化国家超过25％的人口被变应性哮喘、变应性鼻结膜炎及变应性皮炎困扰，其中以变应性哮喘最为常见。吸入致敏花粉是引发变应性哮喘及其他呼吸道变态反应性疾病的最重要因素。VRTA—L.A等调查发现近50％的变态反应性疾病患者对草类花粉过敏。

岳凤敏的《圆柏花粉的生物学及临床过敏初步分析》中指出随机取157例春季花粉症患者，对圆柏花粉过敏占31.8％；Mimura T的《Allergens in Japanese patients withallergic conjunctivitis in autumn》中指出日本的调查显示，春季发作变应性结膜炎的患者，其柏树花粉过敏的阳性率为59.4％；李文静的《圆柏花粉点刺试验阳性患者临床特点分析》中指出圆柏花粉阳性的患者在罹患疾病上表现出明显的倾向性，过敏性鼻炎患者占大多数(64.5％)；冯国歌的《北京地区哮喘患者变应原皮试状况的观察》中指出对就诊并行变应原测试的哮喘患者按不同年龄分组，对其过敏原测试结果进行分析研究，结果表明哮喘患者的阳性率为88.6％。其中圆柏花粉占22.8％；漆可的《北京地区中小学生常见吸入性变应原的调查分析》中指出在北京地区参加调查的学生中，对其中1280名学生进行皮肤点刺试验，495名变应原阳性，北京城区198名中有12％圆柏花粉呈阳性、郊区297名学生中有18％圆柏花粉呈阳性；以上圆柏花粉流行病学调查研究显示，圆柏花粉过敏广泛分布在我国各地，在北方地区圆柏花粉是花粉过敏的主要致敏原。

圆柏科(Cupressaceae,cypress)，裸子植物门，松杉纲。含22属，约150种，分布于南北两半球，是冬春季花粉症常见的致敏原。我国有8属29种，广泛分布于全国，以圆柏等最为常见。在地中海国家，如法国、以色列、西班牙、意大利等，柏树花粉是冬季花粉症的重要变应原。

现在变应原特异免疫治疗的方法主要分为皮下注射给药免疫治疗和舌下给药免疫治疗。皮下注射给药免疫治疗已有100多年历史，其安全性和有效性已经被得到证明。上世纪90年代初，变应原舌下滴剂疫苗诞生，1998年，WHO宣布了变应原舌下滴剂疫苗安全和有效。

但是舌下给药免疫脱敏的方式相比皮下注射免疫给药，治疗周期长，短时间内疗效不显著，平均脱敏周期3-5年。在一个治疗周期中，舌下给药方式免疫脱敏给药量是皮下注射给药量的100倍。所以皮下注射给药免疫脱敏的方式相比舌下给药，虽然病人依从性差，但是治疗周期短，见效快，治疗费用低。

目前，用于圆柏花粉变应原的作为皮下注射免疫制剂的稳定性差，成分不确定，试剂存放一定时间后用于诊断圆柏花粉诱发的变态反应疾病时，阳性率降低，准确性低。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供一种含圆柏花粉变应原浸液，该浸液具有于特异性高，圆柏致敏蛋白组分提取充分且比例恒定，总生物效价稳定，有效期长的特点。其可有效用于变态反应疾病的皮肤点刺试验诊断及特异性免疫治疗，可有效诊断由圆柏花粉诱发的变态反应疾病并对其进行特异性免疫治疗。