[发明专利]依诺肝素钠中残留铵的检测方法

说明书

本发明属于医药技术领域，具体提供了一种依诺肝素钠中残留铵的检测方法。以离子色谱法分析检测依诺肝素钠中的残留铵，采用高效阳离子交换柱分离，以阳离子自动再生抑制器或适宜的化学抑制器的电导检测器检测，以甲磺酸溶液为流动相，外标法定量检测依诺肝素钠中的残留铵。本发明的检测方法，能够快速有效检测依诺肝素钠中的残留铵的含量，线性关系良好，精密度高，准确度良好，重复性和耐用性好，整个操作非常简单，填补了测定依诺肝素钠中残留铵含量的空白。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种依诺肝素钠中残留铵的检测方法。

背景技术

依诺肝素钠是由来源于猪肠黏膜的肝素钠经成盐，酯化后得到的肝素-苯索氯铵盐的苄基酯衍生物在碱性条件下发生beta-消除反应裂解生成的低分子量肝素钠，其主要特征为糖链的非还原末端具有4-烯醇吡喃糖酸，在糖链的还原末端含有15～20％的1,6-酐环状结构。平均分子量为3800～5000，小于2000含量为12.0～20.0％，2000～8000含量为68.0～82.0％。抗FХa活性为90～125IU/mg，抗FⅡa活性为20～35IU/mg，抗FХa/抗FⅡa为3.3～5.3。硫酸根与羧基比不小于1.8。依诺肝素钠结构式如下所示。

依诺肝素钠

对依诺肝素钠的化学结构进行分析，依诺肝素钠主要的降解反应为糖苷键断裂、硫酸基脱落等，依诺肝素钠的这些降解反应可能产生残留的铵根离子、硫酸根离子等，因此需要对产品中的残留铵离子和硫酸根离子进行检测。目前硫酸根离子已有标准且多篇文献已经报道，但是依诺肝素钠中残留铵的检测方法却鲜有报道。因此很有必要提供一种依诺肝素钠中残留铵的检测方法。

发明内容

依诺肝素钠中钠离子含量较高，铵根离子含量较低，检测依诺肝素钠中的残留铵时很容易受到钠离子的干扰，钠离子峰如有拖尾等现象，直接导致铵根离子检测不出。现有技术中铵根离子的检测方法分离度1.5远远不够，不能解决高浓度的钠离子对铵根离子的干扰问题，本发明的目的在于克服依诺肝素钠中残留铵检测时高浓度的钠离子的干扰，提供一种依诺肝素钠中残留铵的检测方法。

本发明的技术方案如下：

一种离子色谱法分析检测依诺肝素钠中残留铵的方法，采用高效阳离子交换柱分离，以阳离子自动再生抑制器或适宜的化学抑制器的电导检测器检测，以甲磺酸溶液为流动相，外标法定量检测依诺肝素钠中的残留铵。

本发明检测残留铵的方法，是采用离子色谱系统检测待测样品；其中色谱柱为CS17阳离子交换柱或性能相当的CS12、CS16阳离子交换柱，流动相为甲磺酸溶液，流速为0.8～1.2mL/min，以阳离子自动再生抑制器检测。

优选地，所述色谱柱规格为4mm×250mm。

更加优选地，所述色谱柱还包括保护柱，例如阳离子交换柱CS17分析柱(4mm×250mm)和CG17保护柱(4mm×50mm)。

优选地，所述方法中，待测样品的进样体积为10～25μL。

优选地，所述方法中，流动相流速为1.0mL/min。

优选地，所述方法是采用甲磺酸溶液进行梯度洗脱；0～40min，甲磺酸溶液浓度为5～60mmol/L。

优选地，所述方法中梯度洗脱表为：

更加优选地，所述方法中梯度洗脱表为：

在一个优选的试验方案中，该检测方法包括如下步骤：

(1)对照品溶液配制