[发明专利]一种抗人B7-H3单克隆抗体的制备方法及其免疫组化检测方法及其应用及其试剂盒

说明书

本发明公开了一种抗人B7‑H3单克隆抗体，包括重链和轻链，所述重链可变区(mVH)的氨基酸序列与SEQ ID NO.1相同，具体如下：EVQLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSRYAMSWVRQTPEKRLEWVATISDDGRNTYDRDSVKGRFTISRDNARNTLYLQMSSLRSEDTALYYCVRHRAITTARFDYWGQGTSLTVSS；所述轻链可变区(mVL)的氨基酸序列与SEQ ID NO.2相同，具体如下：DILMTQSPSSMSVSLGDTVSITCHASQDISSNIGWLQQGPGNSFKGLIYHGTNLEDGVPSRFSGSGSGADYSLTISGLESEDFADYYTLQSVQFPYTFGGGTKLEIK。本发明还公开了其检测方法、应用及试剂盒。本发明提供的抗人B7‑H3单克隆抗体可以用于肿瘤组织的免疫组化检测，提高肿瘤标本免疫组化检测的精确度，有助于恶性肿瘤的诊断、确定原发部位和病理分型，提高肿瘤尤其是低分化或未分化肿瘤的诊断准确率。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种抗人B7-H3单克隆抗体的制备方法及其免疫组化检测方法及其应用及其试剂盒。

背景技术

近年来，越来越多的研究发现，B7-H3分子异常表达在各种肿瘤组织，如卵巢癌、乳腺癌、肺癌、肾癌、结直肠癌、前列腺癌等。临床回顾性病例分析发现，B7-H3的表达与临床病理学特征存在相关性，通过生存分析发现高表达B7-H3的病例预后差，死亡率高，并且在肿瘤患者外周血中也发现了高水平的可溶性B7-H3（sB7-H3）。此外，研究还发现，B7-H3与移植免疫排斥和自身免疫病理相关，转染了B7-H3基因的移植物可以抑制宿主T细胞的活性，从而延长移植物的生存时间。这些研究结果都提示，B7-H3是个重要的负性共刺激分子，具有重要的研究和运用价值。

人类很多肿瘤中，B7-H3在mRNA和蛋白水平上均有表达并且与病人的预后呈负相关。目前已有不少文献对各类肿瘤进行回顾性研究，从临床角度分析B7-H3在抗肿瘤免疫中的功能，包括卵巢癌、食管癌、肾癌、胃癌、肝癌、肺癌、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌和黑色素瘤。

B7-H3异常表达于肿瘤组织或肿瘤患者的外周血中，并和年龄、病理类型、肿瘤生物学效应和患者生存率密切相关。

因此，研制鼠抗人B7-H3单克隆抗体可以为进一步研究该分子在肿瘤中的作用奠定物质基础，同时也为探明B7-H3信号传导通路及机制提供有效的研究手段，有功能的抗人B7-H3单克隆抗体更有望成为肿瘤生物治疗的潜在靶点。

发明内容

为了克服现有技术当中的缺陷，本发明的目的之一在于提供一种抗人B7-H3单克隆抗体。

本发明的目的之二在于提供一种抗人B7-H3抗体在重链和轻链可变区的检测方法。

本发明的目的之三在于提供一种抗人B7-H3单克隆抗体的应用。

本发明的目的之四在于提供一种抗人B7-H3单克隆抗体的试剂盒。

为了实现本发明的目的之一，所采用的技术方案是：

一种抗人B7-H3单克隆抗体，包括重链和轻链，其中，所述重链可变区(mVH)的氨基酸序列与SEQ ID NO.1相同，具体如下：

EVQLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSRYAMSWVRQTPEKRLEWVATISDDGRNTYDRDSVKGRFTISRDNARNTLYLQMSSLRSEDTALYYCVRHRAITTARFDYWGQGTSLTVSS；

所述轻链可变区(mVL)的氨基酸序列与SEQ ID NO.2相同，具体如下：

DILMTQSPSSMSVSLGDTVSITCHASQDISSNIGWLQQGPGNSFKGLIYHGTNLEDGVPSRFSGSGSGADYSLTISGLESEDFADYYTLQSVQFPYTFGGGTKLEIK。