[发明专利]一种拳卷地钱抗氧化活性有效部位的制备方法

说明书

本发明涉及药物领域，特别是一种拳卷地钱抗氧化活性有效部位的制备方法。一种拳卷地钱提取物，其特征在于，所述提取物的制备方法包括如下步骤：将拳卷地钱全草洗净，沥干，干燥至恒定重量，打成粉末。将拳卷地钱粉末300g用体积分数95％的乙醇500ml回流提取3次，每次1h，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；将所得浸膏加水超声成水悬液，即得。本发明的拳卷地钱抗氧化有效部位制备方法优点为工艺简单，溶剂可回收循环使用，生产成本低。

技术领域

本发明涉及药物领域，特别是一种拳卷地钱抗氧化活性有效部位的制备方法。

背景技术

地钱又名地衣，广泛分布于各地，多生于阴暗潮湿的地方。地钱的药用始载于《名医别录》，《本草纲目》中谓之“石衣”，味淡，性凉，归肝经。具有清热利湿、解毒敛疮之功效，主治湿热黄疸、疮痈肿毒、毒蛇咬伤、水火烫伤、刀伤、骨折等。拳卷地钱(Marchantiaconvoluta)为苔藓植物门苔纲地钱科植物,始载于《西藏苔藓植物志》，广泛分布在西藏、广西、贵州等高寒山区，是苔藓植物中常见的中草药之一。

发明内容

为了克服现有技术存在的不足，本发明提供一种拳卷地钱抗氧化活性有效部位的制备方法。

为了达到上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种制备拳卷地钱中抗氧化成分的方法，步骤如下：将拳卷地钱全草洗净，沥干水分，置60℃恒温干燥箱中，干燥至恒定重量，打成粉末。将拳卷地钱粉末用体积分数95％的乙醇回流提取3次，每次1h，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；将所得浸膏加水超声成水悬液，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，收集乙酸乙酯萃取物减压浓缩即得。

本发明采用DPPH、ABTS两种抗氧化模型体外评价确定该有效部位抗氧化活性。DPPH及ABTS实验中EC50值越小说明清除率越高，乙酸乙酯部位显著高于其他部位。DPPH实验表明乙酸乙酯部位EC50值为0.2759±0.0224mg/ml。ABTS实验表明乙酸乙酯部位EC50值为0.2668±0.0528mg/ml。

本发明的拳卷地钱抗氧化有效部位制备方法优点为工艺简单，操作方便，技术易掌握，能耗小，溶剂可回收循环使用，生产成本低。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1拳卷地钱提取物的提取与分离

将拳卷地钱全草洗净，沥干水分，置60℃恒温干燥箱中，干燥至恒定重量，打成粉末。将拳卷地钱粉末300g用体积分数95％的乙醇500ml回流提取3次，每次1h，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；将所得浸膏加水超声成水悬液，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分别收集石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取物，减压浓缩即得。

实施例2清除DPPH自由基实验：

不同的提取物，用无水乙醇溶解，配制成10mg/ml母液。DPPH用无水乙醇配制成0.1mmol/L，至于棕色瓶中备用。96孔板中，每孔分别加入100μL不同浓度的样品溶液和300μLDPPH溶液。室温避光反应30min后使用酶标仪在517nm波长下测定吸光度值(A_S)。100μL无水乙醇混合300μL DPPH溶液测定吸光度值(A_C)。100μL不同浓度的样品溶液混合300μL无水乙醇测定吸光度值(A_B)。

自由基清除率计算公式:清除率(％)＝[A_C-(A_S-A_B)]/A_C×100％

表1 拳卷地钱不同部位提取物对DPPH自由基清除的EC₅₀值

实施例3清除ABTS自由基实验