[发明专利]一种抑制害虫免疫反应的苦瓜素类化合物及其高效制备方法和应用

权利要求书

1.一种苦瓜素类化合物的制备方法，其特征在于，甲醇浸提苦瓜茎叶，进行三级高效液相色谱分离；所述制备方法包括以下步骤：

S1. 新鲜苦瓜茎叶干燥，研磨成粉；

S2. 用甲醇对苦瓜茎叶干粉进行浸提，甲醇与苦瓜茎叶干粉的用量比为1: 5～10（g:mL），浸提液过滤浓缩，得到粗提物；

S3. 对粗提物进行一级高效液相色谱分离，分别收集18～26min时间段和30～42min时间段的流出液，浓缩，即得一级分离物1和一级分离物2；

S4. 分别对一级分离物1和一级分离物2进行二级高效液相色谱分离，对于一级分离物1分别收18～22min时间段和24～26min时间段的流出液，干燥浓缩，得二级分离物1-1和二级分离物1-2，对于一级分离物2收集33～37min时间段的流出液，干燥浓缩，得二级分离物2-1；

S5. 分别对二级分离物1-1、二级分离物1-2、二级分离物2-1进行三级高效液相色谱分离，分别收集20～24min时间段、23～26min时间段以及34～37min时间段的流出液，干燥浓缩，分别得到苦瓜素Ⅱ、苦瓜素L和苦瓜素Ⅰ；

高效液相色谱分离的参数为：流动相为80%甲醇、柱温度为28℃、流速为2.5mL/min、分离柱为Agilent XB-C18、检测波长为210nm；

一级高效液相色谱的上样量与甲醇浸提液的体积比为1～3：2～10；二级高效液相色谱的上样量与一级分离物1或一级分离物2的体积比为1～3：2～10；三级高效液相色谱的上样量与二级分离物1-1、二级分离物1-2或二级分离物2-1的体积比为1～3：2～10。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，浸提过程中采用的甲醇浓度为80～100%，浸提次数为1～3次。

3.权利要求1-2任一所述制备方法制备到的苦瓜素L在制备小菜蛾或斜纹夜蛾酚氧化酶原激活酶抑制剂中的应用。