[发明专利]一种干细胞处理方法及使用该方法得到的细胞和应用

说明书

本发明涉及一种干细胞处理方法及使用该方法得到的细胞和应用。一种干细胞处理方法，包括在所述干细胞的培养基中加入炎症因子的步骤。使用该方法制备的干细胞可以有效逆转胰岛β细胞去分化，为2型糖尿病的预防和治疗提供了可能的途径。

技术领域

本发明涉及一种干细胞处理方法及使用该方法得到的细胞和应用。

背景技术

糖尿病是以持续的高血糖为特征，由胰岛素分泌缺陷和/或胰岛素利用缺陷导致的慢性代谢疾病，包括I型糖尿病，2型糖尿病(Type 2diabetic mellitus,T2DM)和妊娠糖尿病，以2型糖尿病的影响人群最广。随着人们生活水平的提高和生活方式的改变，2型糖尿病的发病率呈现出快速攀升的趋势。中国的糖尿病患病率占全球27％，居全球首位。作为全球糖尿病的第一大国，2017年我国糖尿病患者人数达1.14亿，其中95％左右为T2DM。T2DM已经成为一个严重危害我国人群健康的公共卫生问题，对我国的经济社会发展和人民身体健康产生越来越严重的影响，持续的高血糖意味着将来发生心脑血管疾病、糖尿病、微血管病以及肿瘤和痴呆等疾病的危险性增高，如何有效防止和治疗糖尿病仍然是糖尿病研究所面临的重要课题之一。有研究表明，2型糖尿病与胰岛β细胞去分化有关。

发明内容

为了至少部分地解决糖尿病的有效预防和治疗问题，本专利申请旨在利用干细胞逆转胰岛β细胞去分化，提高去分化胰岛细胞的功能。并进一步的，利用炎症因子或其组合刺激干细胞，提高干细胞逆转胰岛β细胞去分化的能力。

作为本发明的一个方面，涉及一种干细胞处理方法，包括如下步骤：在所述干细胞的培养基中加入炎症因子。

具体来讲，就可以是在所述干细胞的培养基中加入IL-1β、TNF-α、IL-6或其任意组合。在具体实施例中，可以是在培养基中加入终浓度10ng/mL IL-1β与100ng/mL TNF-α；在培养基中加入终浓度10ng/mL IL-1β和100ng/mL IL-6；或在培养基中加入终浓度100ng/mLTNF-α和100ng/mL IL-6。

在一具体实施例中，所述干细胞可以为间充质干细胞。

作为本发明的另一个方面，涉及使用上述干细胞处理方法处理得到的干细胞。

作为本发明的又一个方面，涉及一种干细胞，所述干细胞是经过炎症因子处理的，具体来讲，比如可以是IL-1β、TNF-α、IL-6或其任意组合处理的。

在具体实施例中，所述干细胞可以是经过终浓度10ng/mL IL-1β与100ng/mL TNF-α处理的；经过终浓度10ng/mL IL-1β和100ng/mL IL-6处理的；或是经过终浓度100ng/mLTNF-α和100ng/mL IL-6处理的。

在一具体实施例中，所述干细胞可以为间充质干细胞。

作为本发明的再一个方面，涉及上述干细胞在制备治疗2型糖尿病药物中的应用。

本发明提供的测序文库及其应用，至少实现了如下有益效果：

干细胞可逆转T2DM胰岛β细胞的去分化，经IL-1β、TNF-α或IL-6预刺激的MSCs逆转胰岛β细胞去分化的能力增强，而经过IL-1β和TNF-α组合处理的MSCs逆转胰岛β细胞去分化的能力最强，胰岛素阳性细胞增多，能有效改善胰岛β细胞功能，为2型糖尿病的预防和治疗提供了可能的途径。

附图说明

图1.对照组T2DM胰岛细胞、实验组MSCs共培养后的T2DM胰岛细胞中Insulin⁺FOXO1⁺细胞在胰岛细胞中的比例。

图2.对照组T2DM胰岛细胞、实验组MSCs共培养后的T2DM胰岛细胞中ALDH1a3⁺细胞在胰岛细胞中的比例。