[发明专利]一种抑制Th17细胞活化的间充质干细胞及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种能够抑制Th17细胞活化的间充质干细胞，其特征在于，所述间充质干细胞通过基因修饰的方法，特异表达人白介素23受体类似物，从而竞争性抑制IL-23与IL-23受体的结合；所述人白介素23受体类似物为人白介素23受体胞外区与免疫球蛋白G1的Fc片段的融合蛋白，所述人白介素23受体胞外区由人白介素23受体信号肽以及N-端结构域组成，所述IgG1的Fc片段包括IgG1的重链恒定区CH2、CH3以及铰链区，所述人白介素23受体信号肽的氨基酸序列如SEQ ID No: 1所示，所述N-端结构域的氨基酸序列如SEQ ID No: 2所示，所述人免疫球蛋白G1的Fc片段序列如SEQ ID No:3所示。

2.根据权利要求1中所述的间充质干细胞，其特征在于，编码所述人白介素23受体类似物的基因，全长为1740bp，编码580个氨基酸，分子量约为66.2 kD，包括IL23受体胞外区编码基因、免疫球蛋白G1的Fc片段的编码基因。

3.根据权利要求1中所述的间充质干细胞，其特征在于，所述基因修饰为病毒转染技术。

4.根据权利要求1中所述的间充质干细胞，其特征在于，所述基因修饰为慢病毒转染技术。

5.根据权利要求1中所述的间充质干细胞，其特征在于，所述基因修饰为第四代慢病毒转染技术。

6.根据权利要求1-5任一项中所述的间充质干细胞，其特征在于，所述间充质干细胞为骨髓组织、脂肪组织、脐带组织或胎盘组织来源的间充质干细胞。

7.一种权利要求1-6任一项中所述的间充质干细胞的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

（1）利用病毒载体系统构建人白介素23受体类似物病毒表达质粒，所述人白介素23受体类似物为人白介素23受体胞外区与免疫球蛋白G1的Fc片段的融合蛋白，所述人白介素23受体胞外区由人白介素23受体信号肽以及N-端结构域组成，所述IgG1的Fc片段包括IgG1的重链恒定区CH2、CH3以及铰链区，所述人白介素23受体信号肽的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示，所述N-端结构域的氨基酸序列如SEQ ID No: 2所示，所述人免疫球蛋白G1的Fc片段序列如SEQ ID No:3所示；

（2）将所述人白介素23受体类似物病毒表达质粒导入T细胞，收获病毒；以及

（3）将收获的病毒转染至间充质干细胞，筛选被病毒转染的间充质干细胞，其高表达人白介素23受体类似物。

8.根据权利要求7所述的间充质干细胞的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

（1）利用第四代慢病毒载体系统构建人白介素23受体类似物慢病毒表达质粒，

（2）将所述人白介素23受体类似物慢病毒表达质粒分别与慢病毒pGag/Pol、pRev、pVSV-G框架质粒混合，通过LTX脂质体导入293T细胞，包装得到成熟慢病毒，收获病毒；

（3）将收获的病毒转染至间充质干细胞，24h后加入嘌呤霉素筛选被病毒转染的间充质干细胞，其高表达人白介素23受体类似物。

9.根据权利要求1-6任一项所述的间充质干细胞在制备治疗免疫性疾病的药物中的应用；所述免疫性疾病为人银屑病、炎症性肠病。