[发明专利]一种超深渊来源抗菌肽hydramacin及其制备方法在审
| 申请号： | 201910047681.X | 申请日： | 2019-01-18 |
| 公开（公告）号： | CN109628460A | 公开（公告）日： | 2019-04-16 |
| 发明（设计）人： | 阮灵伟;陈丹;施泓 | 申请（专利权）人： | 自然资源部第三海洋研究所 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C07K14/435;C12N15/70 |
| 代理公司： | 厦门南强之路专利事务所(普通合伙) 35200 | 代理人： | 马应森 |
| 地址： | 361005 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 抗菌肽 核苷酸序列 制备 蛋白 重组蛋白表达 大肠杆菌 氨基酸序列 水产养殖业 蛋白纯度 分离纯化 基因合成 临床医学 序列信息 应用提供 原核表达 载体构建 重组表达 重组质粒 基因 禽畜 异源 应用 | ||
1.Peniagone sp.抗菌肽hydramacin基因，其特征在于编码Peniagone sp.抗菌肽hydramacin的核苷酸序列。
2.如权利要求1所述Peniagone sp.抗菌肽hydramacin基因，其特征在于所述Peniagone sp.抗菌肽hydramacin基因的分子类型为DNA，序列特征：长度为249bp，类型为核酸，链性为双链，拓扑结构为线性，所述Peniagone sp.抗菌肽hydramacin基因的序列如下所示，记为SEQ ID No.1：
3.如权利要求1所述Peniagone sp.抗菌肽hydramacin基因，其特征在于核苷酸序列采用以下方法获得：根据获得的序列信息人工合成得到SEQ ID No.1的序列，序列分析知1～66bp为信号肽序列，切除信号肽后序列为SEQ ID No.2：
之后以合成序列SEQ ID No.4和SEQ ID No.5为引物扩增，获得切除信号肽后的hydramacin基因，然后通过原核重组表达hydramacin基因，纯化hydramacin基因的表达产物；
所述合成序列SEQ ID No.4：CG
所述合成序列SEQ ID No.5：CG
4.如权利要求3所述Peniagone sp.抗菌肽hydramacin基因，其特征在于所述Peniagone sp.抗菌肽hydramacin的分子类型为蛋白质，序列特征：长度为60aa，类型为氨基酸，所述抗菌肽hydramacin的氨基酸序列如下所示，记为SEQ ID No.3：
1GIGDCWATWS RCSQWSDWGT GWLWQSCNDR CKELGRRGGS CQDVSSSCPF SSRAWQCQCY。
5.如权利要求4所述Peniagone sp.抗菌肽hydramacin基因，其特征在于所述蛋白具有SEQ ID No.3所示氨基酸序列的多肽；或将SEQ ID No.3氨基酸序列经过至少1个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，且具有与SEQ ID No.3所示的氨基酸序列相似功能的多肽。
6.如权利要求4所述Peniagone sp.抗菌肽hydramacin的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
1)Peniagone sp.抗菌肽hydramacin的人工合成和序列分析的步骤；
2)Peniagone sp.抗菌肽hydramacin的PCR扩增和序列分析的步骤；
3)Peniagone sp.抗菌肽hydramacin的重组表达及纯化的步骤。
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