[发明专利]一种装载抗肿瘤药物的纳米药物载体、其制备方法及应用

权利要求书

1.一种纳米药物，其特征在于，

所述的纳米药物中的纳米药物载体为如SEQ ID NO.4所示的激烈火球菌铁蛋白衍生物的24聚体，所述的纳米药物载体的药物装载量为50～500个药物分子/每个蛋白多聚体，

所述的纳米药物中的药物为蒽环类抗肿瘤药物阿霉素。

2.权利要求1所述的纳米药物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤(1)制备并纯化如SEQ ID NO.4所示的激烈火球菌铁蛋白衍生物；

步骤(2)使用所示激烈火球菌铁蛋白衍生物装载药物，

其中，步骤(2)具体的方法为：

将激烈火球菌铁蛋白衍生物加入到8M脲溶液中至终浓度为1mg/ml，室温混合反应1小时，使激烈火球菌铁蛋白衍生物壳解聚；

加入药物至终浓度为1mg/ml，室温避光混合孵育2小时后，将反应液转入截留分子量为3KDa的透析袋中，对反应液进行梯度脲透析复性；

最后在磷酸盐缓冲液中透析，得到的纳米药物颗粒溶液经过Superdex 200pg分子筛纯化，得到单分散状态的纳米药物溶液。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，

步骤(1)所述的制备并纯化激烈火球菌铁蛋白衍生物的方法为：

根据激烈火球菌铁蛋白衍生物的氨基酸序列设计出其cDNA序列，构建在表达载体pET22b上，并转化入表达菌株BL21中，利用IPTG诱导激烈火球菌铁蛋白表达后，将菌体用pH8.0，20mM Tris缓冲液重悬后，超声裂解，离心去除大肠杆菌残片，上清液72℃加热15分钟，沉淀杂蛋白，离心去除，上清液在排阻色谱Superdex 200pg柱子上分离纯化。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，

步骤(2)所述梯度脲透析复性的透析条件为：4度、避光透析，所述的梯度脲透析的浓度梯度为脲浓度7M、6M、5M、4M、3M、2M、1M、0，每个梯度透析12小时。

5.权利要求1所述的纳米药物在制备抗肿瘤药物中的应用。