[发明专利]一种钴60辐照对四消丸的质量影响研究方法

说明书

一种钴60辐照对四消丸的质量影响研究方法，具体方法：供试品的制备，对照品溶液的制备，色谱条件选择，测定方法，供试品1相似度试验，供试品2稳定性试验，供试品2重现性试验，灭菌前后指纹图谱的比较试验，灭菌前后样品共3批，每批3个样品，经HPLC进样分析测定，记录色谱图与未灭菌供试品中共有峰相比，钴60辐照灭菌和传统高温灭菌后，供试品样品中色谱峰均没有明显变化。本方法对钴60辐照对四消丸的质量影响进行研究，可得且钴60辐照灭菌薄层色谱与为未灭菌的四消丸的薄层色谱没有明显差异，对四消丸中化学成分的影响也较小。

技术领域

本发明涉及一种钴60辐照对四消丸的质量影响研究方法，具体指纹图谱检测建立方法技术领域。

背景技术

四消丸是由大黄、猪牙皂、牵牛子、牵牛子(炒)、香附、槟榔、五灵脂等七味药材组成。具有消水、消痰、消食、消气，导滞通便等功效，用于一切气食痰水，停积不化，胸腕饱闷，腹胀疼痛，大便秘结等症。

四消丸组方中共有多种中药药材，在药物制备过程中需要对药材进行灭菌处理，传统的灭菌处理方法为高温灭菌方法，高温灭菌在灭菌过程中产生了新的化学成分，虽然对四消丸中大黄素、大黄酚的含量影响也较小，但对四消丸中的化学成分有一定的影响。

钴60辐照灭菌具有穿透力强、不需升高温度和压力且操作简单的特点，因此被越来越多的应用于中药药材的灭菌过程中，本申请的目的即是讨论一种钴60辐照对四消丸的质量影响研究方法。

发明内容

本发明的目的在于提供种一种钴60辐照对四消丸的质量影响研究方法。

本发明一种钴60辐照对四消丸的质量影响研究方法，具体方法包含以下步骤：步骤一、供试品的制备，取四消丸粉末0.6750g，过四号筛，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇25mL，称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀、过滤，量取续滤液5mL，置烧瓶中蒸干，加8％盐酸溶液10mL，超声2min，加氯仿10mL，加热回流1h，放冷，置分液漏斗中，用氯仿润洗，分取氯仿层，将酸液用氯仿提取3次，合用氯仿液，减压蒸干，残渣加甲醇，转移置10mL容量瓶中，定容，即得为供试品1；将其中一部份供试品采用钴60辐照灭菌2-3小时为供试品2；

步骤二、对照品溶液的制备，精密称取大黄素20μg，大黄酚40μg，置5mL容量瓶中，加甲醇至刻度，配制成大黄素、大黄酚混合标准品溶液；

步骤三、色谱条件选择，选择5μm 4.6×150mm的ODS-3柱；流动相为色谱甲醇：0.1％磷酸溶液；检验波长：254nm；流速：1.0mL/min；柱温：25℃；进样体积：20μL；

步骤四、测定方法，吸取参照物溶液和供试品1溶液、供试品2溶液各20μL，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，即得；

步骤五、供试品1相似度试验，将10批以上供试品1和对照品溶液的检测结果导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》软件，经数据匹配，生成对照指纹图谱，计算供试品1共有指纹峰面积与参照物峰面积的比值，并比较供试品1图谱中各共有峰面积比值和指纹图谱各共有峰面积比值的差值，经中药色谱指纹图谱相似度评价系统，对10批以上供试品1指纹图谱和对照指纹图谱经相似度评价，相似度不得低于0.90；

步骤六、供试品2稳定性试验，取一批钴60辐照灭菌的供试品2，在步骤三的色谱条件下，分别于0、6、12、24h下进样，记录指纹图谱，以大黄酸为参照物峰，计算各共有峰相对保留时间和相对峰面积比值，并计算RSD值，单峰面积大于总峰面积5％的共有峰其相对保留时间RSD＜1％，相对峰面积RSD＜3％，将数据文件导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》，进行相似度评价，结果表明指纹图谱的相似度均大于0.98，表明样供试品2在24小时内稳定性良好；