[发明专利]AcMYB123和AcbHLH42基因在调控猕猴桃果肉花青素合成中的应用

说明书

本发明公开了AcMYB123和AcbHLH42基因在调控猕猴桃果肉花青素合成中的应用，涉及植物分子基因工程技术领域，本发明中的AcMYB123基因具有如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，AcbHLH42基因具有如SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列。本发明的有益效果在于：获得红阳猕猴桃花青素合成代谢调控的候选基因，在此基础上构建重组质粒，利用生物化学与分子生物学以及转基因技术手段探讨猕猴桃果实花青素积累的分子调控机理，为优良猕猴桃品种的选育提供新的技术途径。

技术领域

本发明涉及植物分子遗传与基因工程技术领域，具体涉及AcMYB123和AcbHLH42基因在调控猕猴桃果肉花青素合成中的应用。

背景技术

猕猴桃果实富含多种营养成分，包括维生素、类黄酮/花青素、类胡萝卜素、氨基酸、矿质元素等，被誉为“Vc之王”、“水果之王”。猕猴桃已作为高价值农作物在世界各地广泛栽培。而中国是猕猴桃原产地，世界猕猴桃的分布中心，有着丰富的种质资源。中华猕猴桃红阳(Actinidia chinensis Planch.)是第一个商业化栽培的红肉(因富含花青素)猕猴桃品种。因其口感好、营养丰富、果肉红色，深受消费者喜爱，商业价值远高于普通猕猴桃品种。

花青素的富集是红阳猕猴桃果肉呈现红色的原因，花青素是水溶性的植物色素，赋予花瓣和果实鲜艳的颜色，吸引动物授粉和种子传播。花青素属于黄酮类化合物，具很强的抗氧化能力。在植物抵御生物胁迫(病原体入侵)和非生物胁迫时(低温、紫外损伤、缺氮)，花青素能消耗超氧离子减少氧化损伤；在动物体内花青素可以起到抗肿瘤、预防心血管疾病，提高免疫力的作用。可见，研究猕猴桃果实花青素合成积累的调控机制具有重要的理论和实际意义。

发明内容

本发明解决的技术问题在于提供AcMYB123和AcbHLH42基因在调控猕猴桃果肉花青素合成中的应用，从而调控果肉花青素的积累。

本发明是采用以下技术方案解决上述技术问题的：

AcMYB123和AcbHLH42基因在调控猕猴桃果肉花青素合成中的应用，所述AcMYB123基因具有如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，所述AcbHLH42基因具有如SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列。

优选的，所述AcbHLH42基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示，所述AcbHLH42基因编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。

优选的，所述AcMYB123和AcbHLH42基因均分离自红阳猕猴桃内外果肉。

优选的，所述AcMYB123和AcbHLH42基因的真核重组质粒为pHB-AcMYB123/AcbHLH42。

优选的，所述pHB-AcMYB123/AcbHLH42重组质粒为双基因重组质粒，将AcMYB123与AcbHLH42全长基因分别构建在过表达载体的pHB载体的MCS区域与原Bar区。

优选的，所述AcMYB123基因和所述AcbHLH42基因在调控猕猴桃果肉花青素合成中的应用，包括以下步骤：

(1)构建双基因重组质粒pHB-AcMYB123/AcbHLH42；

(2)经PCR酶切验证正确后形成35S::AcMYB123+35S::AcbHLH42，并转化农杆菌；

(3)采用瞬时或农杆菌介导的稳定转化法，将双基因重组质粒pHB-AcMYB123/AcbHLH42导入猕猴桃、烟草或拟南芥中。

优选的，所述双基因重组质粒pHB-AcMYB123/AcbHLH42质粒的构建方法为将AcMYB123与AcbHLH42全长基因分别构建在过表达载体的pHB载体的MCS区域与原Bar区。

本发明的有益效果在于：