[发明专利]用于改善的病毒生产的禽类细胞

权利要求书

1.禽类细胞，其与同等的未修饰的或未处理的野生型细胞相比具有降低的鸡IFITM2(SEQ ID No.2)或与其具有至少90％序列同一性的变体的表达和/或活性；其中与所述同等的未修饰或未处理的野生型细胞相比，具有降低的所述多肽的表达和/或活性的所述禽类细胞对于病毒传染更易感。

2.根据权利要求1的禽类细胞，其与同等的未修饰的或未处理的野生型细胞相比还具有以下一种或多种的降低的表达和/或活性：鸡IFITM1(SEQ ID No.1)或与其具有至少90％序列同一性的变体；和鸡IFITM3(SEQ ID No.3)或与其具有至少90％序列同一性的变体。

3.根据权利要求1或2的禽类细胞，其中所述禽类细胞在禽类胚胎内，源自于禽类胚胎或者是禽类细胞系。

4.根据权利要求3的禽类细胞，其为鸡胚胎成纤维细胞(CEF)。

5.根据权利要求1至4中任一项的禽类细胞，其中：

(a)所述禽类细胞包含鸡IFITM2(SEQ ID No.2)或与其具有至少90％序列同一性的变体的突变体形式，和任选地还包含一种或多种以下多肽的突变体形式：鸡IFITM1(SEQ IDNo.1)或与其具有至少90％序列同一性的变体和鸡IFITM3(SEQ ID No.3)或与其具有至少90％序列同一性的变体，其中所述突变体形式与降低的对病毒性感染的抗性相关；

(b)编码鸡IFITM2(SEQ ID No.2)或与其具有至少90％序列同一性的变体的核苷酸序列；和任选地编码鸡IFITM1(SEQ ID No.1)或与其具有至少90％序列同一性的变体和鸡IFITM3(SEQ ID No.3)或与其具有至少90％序列同一性的变体中的一种或多种的核苷酸序列不存在于其基因组中；或者

(c)鸡IFITM2(SEQ ID No.2)或与其具有至少90％序列同一性的变体的表达；和任选地鸡IFITM1(SEQ ID No.1)或与其具有至少90％序列同一性的变体和鸡IFITM3(SEQ IDNo.3)或与其具有至少90％序列同一性的变体中的一种或多种的表达通过RNA干扰(RNAi)降低。

6.用于繁殖病毒的方法，其包括以下步骤：

(i)使用病毒转导根据权利要求1至5中任一项的禽类细胞；和

(ii)传代所述细胞以繁殖所述病毒。

7.用于生产疫苗的方法，其包括以下步骤：

(i)根据权利要求6繁殖病毒；和

(ii)将繁殖的病毒掺入疫苗中。

8.用于生成减毒病毒的方法，其包括以下步骤：

(i)使用病毒转导根据权利要求1至6中任一项的禽类细胞；和

(ii)传代所述禽类细胞，使得所述病毒完成多轮感染并变得减毒。

9.用于生产疫苗的方法，其包括以下步骤：

(i)根据权利要求8使病毒减毒；

(ii)繁殖减毒的病毒；和，

(iii)将(ii)中生成的病毒掺入疫苗中。

10.根据权利要求6至9中任一项的方法，其中所述病毒经由酸性内体进入。

11.产生转基因禽类动物的方法，其包括以下步骤：降低，敲低，或敲除鸡IFITM2(SEQID No.2)或与其具有至少90％序列同一性的变体的表达和/或活性；并且任选地降低，敲低，或敲除鸡IFITM1(SEQ ID No.1)或与其具有至少90％序列同一性的变体和鸡IFITM3(SEQ ID No.3)或与其具有至少90％序列同一性的变体中的一种或多种的表达和/或活性。