[发明专利]检测氯丙那林的酶联免疫试剂盒及其应用有效

专利信息
申请号: 201910037682.6 申请日: 2019-01-16
公开(公告)号: CN109813922B 公开(公告)日: 2023-01-20
发明(设计)人: 万宇平;冯才伟;王兆芹;朱亮亮;崔海峰;贾芳芳;魏力杰;丛倩千;曹东山;赵正苗 申请(专利权)人: 北京勤邦生物技术有限公司
主分类号: G01N33/94 分类号: G01N33/94
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 102206 北京市昌平*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 检测 免疫 试剂盒 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种检测氯丙那林的酶联免疫试剂盒,其特征在于包括:包被有包被原的酶标板、氯丙那林标准品溶液、氯丙那林抗体、酶标二抗、底物显色液、终止液、洗涤液、复溶液,所述包被原为氯丙那林偶联抗原,所述酶标二抗为酶标记的氯丙那林抗抗体,所述氯丙那林抗体是以氯丙那林偶联抗原作为免疫原免疫动物得到的,所述氯丙那林偶联抗原是由氯丙那林半抗原与载体蛋白偶联得到,所述氯丙那林半抗原的制备方法如下:

取3-(2-氯苯基)环氧乙烷-2羧酸1.0g,加甲醇50ml溶解,加异丙胺0.31g,搅拌10min,充分混匀,滴加冰乙酸0.2ml,65℃加热,搅拌反应24h;停止反应,旋蒸,除去甲醇,加水30ml,乙酸乙酯50ml×3萃取三次,合并有机相,无水硫酸钠干燥,上硅胶柱,二氯甲烷与甲醇的体积比为10:1,洗脱分离,得到羧基氯丙那林1.2g,收率93%,即为半抗原产物;

所述氯丙那林半抗原的分子结构式为:

2.如权利要求1所述的试剂盒,所述氯丙那林抗体为氯丙那林单克隆抗体或氯丙那林多克隆抗体。

3.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述免疫原的制备方法如下:

取羧基氯丙那林半抗原16mg,加DMF 1ml溶解,加N-琥珀酰亚胺8.5mg,加环己基碳二亚胺18mg,室温反应3h,有少量浑浊,过滤除去沉淀,得到半抗原活化液A液;取白喉毒素10mg,加0.02M PB 2ml缓冲液溶解,得到B液,将A液滴加到B液中,4℃反应12h,0.02M PB缓冲液透析纯化3天,每天换液3次,得到免疫原。

4.一种检测样品中氯丙那林含量的方法,包括步骤:

(1)样品前处理;

(2)用权利要求1~3任一项所述的试剂盒进行检测;

(3)分析检测结果。

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