[发明专利]一种检测水体细菌数量的荧光显微计数方法

权利要求书

1.一种检测水体细菌数量的荧光显微计数系统，其特征在于，所述检测水体细菌数量的荧光显微计数系统包括：

光源模块、图像采集模块、中央控制模块、对焦模块、滤色模块、放大模块、图像处理模块、标记模块、显示模块；

光源模块，与中央控制模块连接，用于通过超高压汞灯对水体进行照明；

图像采集模块，与中央控制模块连接，用于通过荧光显微镜采集水体细菌图像数据；

中央控制模块，与光源模块、图像采集模块、对焦模块、滤色模块、放大模块、图像处理模块、标记模块、显示模块连接，用于通过单片机控制各个模块正常工作；

对焦模块，与中央控制模块连接，用于通过物镜调节对水体样本的焦距进行对焦操作；

滤色模块，与中央控制模块连接，用于通过激发滤板、压制滤板对显示的荧光细菌进行滤色操作；

放大模块，与中央控制模块连接，用于通过物镜和目镜放大水体细菌荧光图像；

图像处理模块，与中央控制模块连接，用于通过图像处理软件对采集的图像进行提高分辨率操作；

标记模块，与中央控制模块连接，用于通过标记程序对细菌荧光图像的荧光进行标记计数；

显示模块，与中央控制模块连接，用于通过显示器显示采集的具有荧光的水体细菌图像及标记数据。

2.一种如权利要求1所述的检测水体细菌数量的荧光显微计数方法，其特征在于，所述检测水体细菌数量的荧光显微计数方法包括以下步骤：

步骤一，通过光源模块超高压汞灯对水体进行照明；通过图像采集模块利用荧光显微镜采集水体细菌图像数据；

步骤二，中央控制模块通过对焦模块利用物镜调节对水体样本的焦距进行对焦操作；

步骤三，通过滤色模块利用激发滤板、压制滤板对显示的荧光细菌进行滤色操作；

步骤四，通过放大模块利用物镜和目镜放大水体细菌荧光图像，通过图像处理模块利用图像处理软件对采集的图像进行提高分辨率操作；

步骤五，通过标记模块利用标记程序对细菌荧光图像的荧光进行标记计数；

步骤六，通过显示模块利用显示器显示采集的具有荧光的水体细菌图像及标记数据。

3.如权利要求1所述检测水体细菌数量的荧光显微计数系统，其特征在于，所述对焦模块方法如下：

(1)在轴向扫描荧光样本过程中选取多个清晰对焦的特征区域，并记录每个特征区域的清晰图像和位置；

(2)利用记录的所述清晰图像对移动后采集的样本图像进行匹配，并更新各个子区域的中心坐标；

(3)根据每个对焦区域的中心坐标获取角度和轴向位置的移动量，以移动后进行图像匹配对准，并测量所述每对焦区域的中心坐标后再次迭代优化，以实现对焦。

4.如权利要求3所述检测水体细菌数量的荧光显微计数系统，其特征在于，所述步骤(1)包括：

移动所述荧光样本至视场中心范围；

轴向移动所述荧光样本到显微镜视场中有一个位置附近的图像最清晰，并记第n次选取的区域为I_n，记录该区域的轴向位置Z_n⁰和中心坐标(X_n⁰,Y_n⁰)；

检测清晰视场的个数；

如果所述个数大于预设值，则停止选取。

5.如权利要求3所述检测水体细菌数量的荧光显微计数系统，其特征在于，所述步骤(3)包括：

根据各子图中心的水平坐标(X_nⁱ,Y_nⁱ)和轴向位置Z_nⁱ得到俯仰台旋转角θ，φ和轴向位移台移动距离z；

根据所述俯仰台旋转角θ，φ和轴向位移台移动距离z依次驱动俯仰台和轴向平移台移动。