[发明专利]应用于对虾病原高通量检测的玻片微量检测系统

权利要求书

1.应用于对虾病原高通量检测的玻片微量检测系统，其特征在于：包括设有检测扩增池的微量检测玻片、微量移液器以及用于可视化核酸扩增检测的成像设备；微量检测玻片经丝网印刷疏水、疏油涂层，预留出检测扩增池，检测扩增池经超亲水改性，并且设有预包被的反应试剂和特定病原的特异性引物，检测扩增池在检测时设置封堵件；微量移液器由2～8根专用移液针组成，移液针为圆柱体，直径为1mm，移液针侧表面涂布超疏水疏油涂层，底面经超亲水处理；成像设备内设有电池、LED恒流驱动IC和蓝色LED，三者之间通过线路连接，成像设备内还设有玻片槽，玻片槽上方设有金黄色的滤光片，玻片槽两侧等间距、对称的各设置有4个蓝色LED。

2.如权利要求1所述的应用于对虾病原高通量检测的玻片微量检测系统，其特征在于：所述微量检测玻片共设置有48组相同的检测池，所述各检测池呈4×12布置，每12个检测池1行，分别对应设置4列。

3.如权利要求1所述的应用于对虾病原高通量检测的玻片微量检测系统，其特征在于：所述封堵件为二甲基硅油。

4.一种权利要求1中的微量检测玻片的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)制版：菲林——曝光——硬化——显影；

(2)丝网印刷疏水、疏油涂层；步骤(2)为①调配专用油墨，要求疏水疏油，为在基础油墨中添加聚四氟乙烯专用树脂、氟碳添加剂、二氧化硅中的一种或一种以上的混合物；②把做好的网版装入丝印台，作准定位；③将调配好的油墨倒入丝网，进行丝网印刷，印完的玻片插入专用合金架子；

(3)玻片固化；

(4)玻片清洁处理；

(5)检测池超亲水处理；

(6)检测池预包被检测试剂；

(7)玻片检测池预包埋检测试剂冻干处理；所述步骤(7)检测池预包埋检测试剂的冻干保护剂分别为明胶、海藻糖、牛血清白蛋白BSA、硫脲，占比依次为质量体积比2％～3％、10％～15％、1％～2％、1％～2％；

(8)玻片真空包装得到合格品。

5.如权利要求4所述的微量检测玻片的制备方法，其特征在于：微量检测玻片质地为常规载玻片，尺寸为25×75mm；检测池直径为2.25mm，检测池之间的间距为3.00mm。

6.如权利要求4所述的微量检测玻片的制备方法，其特征在于：步骤(1)为①根据微量检测玻片的结构示意图制作菲林；②用300目的丝网制作网版，等干燥后备用；③将做成的空白网版进行脱脂清洗处理，备用；④在洁净的网版上涂布感光胶，必要的时候多次涂布；⑤在鼓风干燥箱中烘干上胶的网版，多次涂布多次烘干；⑥将菲林感光面向上放置在晒版台玻璃上，放上涂布好的网版，真空抽气使菲林与丝网版紧密贴牢，打开晒版灯进行感光制版；⑦把感光结束的网版在水里冲洗显影，观察制版效果，达到质量要求就放入烘箱中烘干。

7.如权利要求4所述的微量检测玻片的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)为将玻片连架子一起放入鼓风干燥箱，200℃烘烤90min，使油墨充分固化；步骤(4)为把固化后的成品载玻片放入清洗剂浸泡80min，然后在清洗机进行后道清洗，对清洗干净的玻片检验；步骤(5)为将超亲水ZXL-CQS纳米自洁液均匀涂抹或喷洒于各检测池内，固化干燥后即可。

8.如权利要求4所述的微量检测玻片的制备方法，其特征在于：所述步骤(6)各检测池分别预包埋检测试剂：Bst 2.0WarmDNA聚合酶、WarmRTx反转录酶、10×Bstbuffer、10mM dNTPs、5M Betaine、100mM MgSO₄、350mM MnCl₂、3.5mM Caclein、ddH₂O以及对虾8种病原的特异性引物，所述对虾8种病原包括对虾WSSV、IHHNV、SHIV、AHPND、EHP、YHV-8、TSV、CMNV。