[发明专利]基于PCB板的数字微流控芯片及病原体免疫检测方法

权利要求书

1.一种基于PCB板的数字微流控芯片，其特征在于，包括上层芯片、下层芯片和连接两者的间隔层(6)，所述上层芯片包括ITO玻璃(5)，所述下层芯片包括PCB板基底层(1)，所述PCB板基底层(1)上设有引脚区和由电极形成的工作区(100)，所述工作区(100)包括储液池(9)、液滴生成单元(200)、样品池(8)、分析单元(300)和废液池(10)，所述PCB板基底层(1)上部设有绝缘层(2)，所述储液池(9)通过液滴产生单元(200)与分析单元(300)连通，所述样品池(8)与所述分析单元(300)连通，所述废液池(10)供分析单元(300)反应后的废液流入。

2.根据权利要求1所述的数字微流控芯片，其特征在于，所述间隔层(6)有两个，分设于所述数字微流控芯片的两端且位于工作区(100)的两侧，每个间隔层(6)的上端与所述上层芯片连接，底端与下层芯片连接。

3.根据权利要求1所述的数字微流控芯片，其特征在于，所述ITO玻璃底面以及所述绝缘层顶面分别设有特氟龙层(4)。

4.根据权利要求1所述的数字微流控芯片，其特征在于，所述引脚区设有120P插槽(7)。

5.根据权利要求1所述的数字微流控芯片，其特征在于，所述储液池(9)有5个，分别灌注鼠抗HbsAg抗体溶液、HRP标记抗鼠二抗、HRP底物显色液、PBS缓冲液、HRP标记抗人IgG二抗；所述样品池(8)有两个，分别灌注待测样品。

6.根据权利要求5所述的数字微流控芯片，其特征在于，所述分析单元(300)有两个，每个分析单元对应连通一个样品池，每个分析单元包括四个检测区(11)，分别为a、b、c和d检测区，各检测区电极上分别对应包被有抗HbsAg抗体、HIV抗原、HCV抗原和TP抗原。

7.一种采用权利要求1-6任意一项中所述数字微流控芯片的病原体免疫检测方法，其特征在于，所述数字微流控芯片包括5个储液池，分别为A、B、C、D和E储液池，分别灌注鼠抗HbsAg抗体溶液、HRP标记抗鼠二抗、HRP底物显色液、PBS缓冲液、HRP标记抗人IgG二抗；包括如下步骤：

(1)样品池产生的样品液滴进入分析单元，在分析单元充分反应，反应后的液滴排入到废液池；

(2)D储液池产生PBS液滴，重复步骤(1)中样品液滴路径，洗去非特异结合血清，多次重复后，废液排入到废液池；

(3)A储液池产生鼠抗HbsAg抗体液滴，通过液滴生成单元进入到分析单元，反复浸润后由D储液池产生PBS液滴进行润洗；

(4)B储液池产生的二抗液滴浸润分析单元，E储液池产生的抗人二抗液滴浸润分析单元，并用PBS洗涤；

(5)C储液池生成显色液液滴，通过液滴生成单元输送至分析单元进行显色反应；

(6)反应结果由CCD拍照，并进行灰度分析，与阴性、阳性内控标准比较，自动做出结果判断。

8.根据权利要求7所述的病原体免疫检测方法，其特征在于，所述数字微流控芯片包括两个分析单元，每个分析单元对应连通一个样品池，每个分析单元包括四个检测区，分别为a、b、c和d检测区，各检测区电极上分别对应包被有抗HbsAg抗体、HIV抗原、HCV抗原和TP抗原；

所述步骤(3)中A储液池产生鼠抗HbsAg抗体液滴进入到分析单元的d区；

所述步骤(4)中B储液池产生的二抗液滴浸润分析单元的d区，E储液池产生的抗人二抗液滴浸润分析单元的a、b、c区；

所述步骤(5)中C储液池生成显色液液滴，通过液滴生成单元分别输送至分析单元的a、b、c、d检测区进行显色反应。

9.根据权利要求7所述的病原体免疫检测方法，其特征在于，所述数字微流控芯片的绝缘层的制作方法如下：在PCB板基底层上旋涂10um厚SU8-3010，整体紫外曝光15秒固化，形成绝缘层。

10.根据权利要求9所述的病原体免疫检测方法，其特征在于，在所形成的绝缘层表面再次旋涂150um厚SU8-3050，用掩膜在SU8间隔层区曝光80s，乳酸乙酯洗去未曝光部分，留下固化的SU8间隔层。