[发明专利]猪圆环病毒3型抗原表位多肽及其应用有效
| 申请号: | 201910028770.X | 申请日: | 2018-01-03 |
| 公开(公告)号: | CN109627292B | 公开(公告)日: | 2021-02-09 |
| 发明(设计)人: | 董春娜;张蕾;李静;肖进;张文亮;向王震;张欣;齐鹏 | 申请(专利权)人: | 中牧实业股份有限公司 |
| 主分类号: | C07K14/01 | 分类号: | C07K14/01;G01N33/569 |
| 代理公司: | 北京惟诚致远知识产权代理事务所(普通合伙) 11536 | 代理人: | 王慧凤;李巍 |
| 地址: | 100070 北京市丰台*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 圆环 病毒 抗原 多肽 及其 应用 | ||
1.序列表中序列1所示的多肽、序列表中序列2和序列表中序列3所示的多肽在制备检测猪圆环病毒3型抗体的间接ELISA检测试剂盒中的应用。
2.一种猪圆环病毒3型ELISA抗体检测试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒包含猪圆环病毒3型抗原表位多肽组合物作为抗原包被的酶联反应板、阳性对照血清、阴性对照血清和酶标二抗;所述猪圆环病毒3型抗原表位多肽或多肽组合物,为由序列表中序列1所示的多肽、序列表中序列2和序列表中序列3所示的多肽组成的猪圆环病毒3型抗原表位多肽组合物;所述酶标二抗为辣根过氧化物酶标记兔抗猪IgG抗体;所述阳性对照血清为用猪圆环病毒3型病毒灭活病毒免疫后采集的猪血清;所述阴性对照血清为无猪圆环病毒的猪血清。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述酶联反应板的制备方法是将猪圆环病毒3型抗原表位多肽组合物溶于100μl的 pH 9.6的碳酸盐溶液,然后加到96孔聚苯乙烯酶联反应板,每孔150ng猪圆环病毒3型抗原表位多肽组合物,2~8℃下放置8~12小时,使猪圆环病毒3型抗原表位多肽组合物与酶联反应板充分结合,然后按照300μl/孔加入含有0.01g/ml牛血清白蛋白pH7.4的PBS缓冲液,37℃封闭处理2~3小时,甩干后,待酶联反应板干燥后4℃密封保存。
4.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括底物液A、底物液B和终止液,所述底物液A为含0.6mg/ml过氧化氢尿素的柠檬酸磷酸盐缓冲液,所述底物液B为0.2mg/ml的四甲基联苯胺溶液,使用时两者以1:1的比例混合;所述终止液为2mol/L的硫酸溶液;所述试剂盒还包括样品稀释液和浓缩洗涤液;样品稀释液为含有0.005酪蛋白的0.01mol/L、 pH值为7.4的磷酸盐缓冲液;浓缩洗涤液为含有体积百分浓度为0.8%~1.2%的Tween-20的0.01mol/L,pH 值为7.4的磷酸盐缓冲液。
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