[发明专利]一种靶细胞的识别与杀伤方法在审
申请号: | 201910027891.2 | 申请日: | 2019-01-11 |
公开(公告)号: | CN109797189A | 公开(公告)日: | 2019-05-24 |
发明(设计)人: | 周双念 | 申请(专利权)人: | 深圳市双科生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02;C12N5/0783 |
代理公司: | 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 | 代理人: | 齐则琳;张雷 |
地址: | 518000 广东省深圳市龙华区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 靶细胞 杀伤 高表达 高活性 杀伤能力 微环境 阴性 分泌 嵌合 培育 样本 应用 恢复 | ||
本发明公开了一种靶细胞的识别与杀伤方法,包括:培育具有高表达NKg2d的NK细胞;培育具有高活性的CTL细胞;将具有高表达NKg2d的NK细胞和具有高活性的CTL细胞注入异常靶细胞样本,在其微环境下,NK细胞分泌的部分NKg2d嵌合在同种CTL细胞表面,恢复CTL细胞的识别与杀伤能力,实现CTL细胞对MHC‑1类分子阳性的靶细胞识别、杀伤和清除,同时应用NK细胞的非MHC‑1限制性特点,对非MHC‑1类分子阴性的靶细胞进行识别、杀伤以及清除。
技术领域
本发明涉及细胞领域,尤其涉及一种靶细胞的识别与杀伤方法。
背景技术
存在异常靶细胞的样本中,CTL细胞表面的识别受体NKg2d容易脱落导致其对异常靶细胞的识别性能下降,难以杀伤低表达MHC-1类分子的异常靶细胞。
发明内容
为了克服现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种靶细胞的识别与杀伤方法,以识别与杀伤异常靶细胞。
本发明的目的采用如下技术方案实现:
一种靶细胞的识别与杀伤方法,包括:
培育具有高表达NKg2d的NK细胞;
培育具有高活性的CTL细胞;
将具有高表达NKg2d的NK细胞和具有高活性的CTL细胞注入异常靶细胞样本,以使部分NKg2d粘连于所述CTL细胞。
进一步地,培育具有高表达NKg2d的NK细胞之前还包括:
从样本中提取出NK细胞样本和CTL细胞样本。
进一步地,从样本中提取出NK细胞样本和CTL细胞样本之后还包括:
将所述NK细胞样本和所述CTL细胞样本进行分离、培育和扩增。
相比现有技术,本发明的有益效果在于:将具有高表达NKg2d的NK细胞和具有高活性的CTL细胞注入异常靶细胞样本,以使部分NKg2d粘连于CTL细胞,从而使CTL细胞释放颗粒酶,溶酶体,穿孔素,Fas,IFN等,实现CTL细胞对MHC-1类分子阳性的靶细胞识别、杀伤和清除,同时应用NK细胞的非MHC-1限制性特点,对非MHC-1类分子阴性的靶细胞进行识别、杀伤以及清除。
附图说明
图1为本发明实施例提供的靶细胞的识别与杀伤方法。
具体实施方式
下面,结合附图以及具体实施方式,对本发明做进一步描述,需要说明的是,在不相冲突的前提下,以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。
如图1所示,本发明实施例提供的靶细胞的识别与杀伤方法,包括:
步骤S101:培育具有高表达NKg2d的NK细胞。
较佳的,培育NK细胞之前,从样本中提取出NK细胞样本和CTL细胞样本,其中,样本与靶细胞来自同一主体,样本中的NK细胞正常表达NKg2d,CTL细胞表面有NKg2d。提取出NK细胞样本和CTL细胞样本后,将NK细胞样本和所述CTL细胞样本进行分离、培育和扩增,通过现有培育方法培育出高表达NKg2d的NK细胞。
步骤S102:培育具有高活性的CTL细胞。
具体的,培育高活性的CTL细胞以使CTL细胞与NKg2d有效结合。
步骤S103:将具有高表达NKg2d的NK细胞和具有高活性的CTL细胞注入异常靶细胞样本,以使部分NKg2d粘连于所述CTL细胞。
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