[发明专利]一株能够防治芝麻枯萎病且具有促生和诱导抗性作用的拜赖青霉及其筛选方法和应用

说明书

本发明公开了一株能够防治芝麻枯萎病且具有促生和诱导抗性作用的拜赖青霉及其筛选方法和应用，所述的拜赖青霉为拜赖青霉(Penicillium bilaiae)47M‑1，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址：武汉大学保藏中心，保藏编号：CCTCC M：2018899，保藏日期：2018年12月17日。该菌株不仅对芝麻尖孢镰刀菌有强烈的抑制作用，对芝麻上其它主要病害的病原菌也具有广谱的抑菌活性，且能够促进作物生长，诱导作物产生抗性，对作物没有致病性，不会产生抗药性、农药残留、环境污染等化学农药常见问题，对人畜健康、环境友好，符合人们对生态农业的需求。

技术领域

本发明涉及一株能够防治芝麻枯萎病且具有促生和诱导抗性作用的拜赖青霉及其筛选方法和应用，属于微生物技术领域。

背景技术

镰刀菌引起的枯萎病是一类世界性分布的重要土传病害，危害多种粮食作物和经济作物，被称为植物的癌症。尖孢镰刀菌在植株的全生育期均可侵染，通常是侵染寄主植物输导组织维管束系统，引起植物的根腐、茎腐、茎基腐、花腐和穗腐等多种病害，并在生长发育代谢过程中产生毒素危害作物，造成作物萎蔫死亡，影响作物的产量和品质，是生产上最难防治的重要病害之一。

目前防治枯萎病的主要方法是培育抗病品种、使用化学药剂和利用农业措施等，但由于枯萎病属于土传病害，在防治中往往效果都不太理想，缺乏有效的防治手段。因此使用对人体和生态环境无害的微生物制剂及其代谢产物替代化学农药，已成为世界范围内的发展方向。我国已报道的对枯萎病病原菌有抑制作用的生防菌主要有木霉、丛枝菌根菌、淡紫拟青霉菌、荧光假单胞杆菌、放线菌等。青霉在芝麻枯萎病上的防治应用未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一株能够防治芝麻枯萎病且具有促生和诱导抗性作用的拜赖青霉及其筛选方法和应用，该拜赖青霉对芝麻尖孢镰刀菌具有强抑菌活性，且能促进芝麻生长，诱导芝麻对枯萎病的抗性，对芝麻上其他主要病害的病原菌也具有良好的抑制效果。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：

一株能够防治芝麻枯萎病且具有促生和诱导抗性作用的拜赖青霉，所述的拜赖青霉为拜赖青霉(Penicillium bilaiae)47M-1，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址：武汉大学保藏中心，保藏编号：CCTCC M：2018899，保藏日期：2018年12月17日。

拜赖青霉的筛选方法：采用平板稀释分离法，将三门峡市渑池县西村乡石沟村的土壤样品，加无菌水制成不同梯度的稀释液，取100μL不同梯度的稀释液，涂布孟加拉红培养基，挑取单菌落分离纯化后，以尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)为靶标菌，利用平板抑菌试验筛选出对芝麻尖孢镰刀菌具有强抑菌活性的菌株，并鉴定为拜赖青霉。

一种拜赖青霉在防治芝麻病害方面的应用。

一种拜赖青霉在促进芝麻生长方面的应用。

一种拜赖青霉在诱导芝麻对枯萎病的抗性方面的应用。

一种拜赖青霉在制备防治芝麻枯萎病且促进芝麻生长和诱导芝麻对枯萎病抗性的菌剂中的应用。

一种利用拜赖青霉制备的具有防治芝麻枯萎病、促进芝麻生长和诱导芝麻对枯萎病产生抗性作用的菌剂。

一种上述菌剂的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

(1)将拜赖青霉接种于PDA培养基上，在28℃、16h光照/8h黑暗的恒温培养箱中培养5d，用0.05％(v/v)的吐温80无菌水洗脱孢子，形成孢子悬浮液；

(2)按黄豆120g/袋，麦芽糖0.12g/袋，水60mL/袋配制固体发酵培养基；将配制好的固体发酵培养基，平铺放置10～12h后，121℃灭菌30min；