[发明专利]磁珠法培养贴壁细胞在审
申请号: | 201910022715.X | 申请日: | 2019-01-10 |
公开(公告)号: | CN109628372A | 公开(公告)日: | 2019-04-16 |
发明(设计)人: | 方松刚 | 申请(专利权)人: | 武汉济源高科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00;C12N13/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 430073 湖北省武汉市:东湖高新技术*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 贴壁细胞培养 细胞 磁珠 传代 成纤维细胞 液体培养基 表皮细胞 磁珠表面 培养贴壁 贴壁细胞 外加磁场 微型磁珠 培养基 包被液 磁吸附 磁珠法 干细胞 贴附 科研 应用 | ||
1.一种磁珠培养贴壁细胞的方法,包括磁珠包被液的配置、微型磁珠的包被方法、微型磁珠培养贴壁细胞的接种方法、微型磁珠培养贴壁细胞的传代方法和微型磁珠培养贴壁细胞的手机纯化方法。
2.如权利要求1所述的磁珠培养贴壁细胞的方法,其特征在于磁珠包被液的配置配方中包含胶原蛋白和纤维粘连蛋白。
3.如权利要求1所述的磁珠培养贴壁细胞的方法,其特征在于磁珠的包被方法为37℃包被24h。
4.如权利要求1所述的磁珠培养贴壁细胞的方法,其特征在于细胞接种的方法中接种细胞和磁珠的比例为2:1。
5.如权利要求1所述的磁珠培养贴壁细胞的方法,其特征在于细胞收集纯化的方法为收集细胞液,在外加磁场的作用或者用磁力吸附架下,富集磁珠,去掉培养基,加入与磁珠等体积的0.25%胰酶,消化1分钟,加入2倍磁珠体积终止液(小牛血清),将消化液加入到带磁场的过滤柱中,再加入3倍体积洗脱液进行洗脱,将洗脱液进行1200rpm离心8分钟,得到细胞沉淀,注意观察离心管底部是否有残留的磁珠,如果含有残留磁珠,加入5倍体积生理盐水重悬细胞,再次加入到磁场的过滤柱中,加入3倍体积洗脱液进行洗脱,将洗脱液进行1200rpm离心8分钟,得到细胞沉淀。
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