[发明专利]一种伊木萨克片作用于阴茎勃起功能障碍人血清差异蛋白组合及其筛选方法和应用

权利要求书

1.一种伊木萨克片作用于阴茎勃起功能障碍人血清差异蛋白组合在制备检测伊木萨克片治疗阴茎勃起功能障碍的效果的试剂盒中的应用；

所述蛋白组合由以下45种蛋白组成；

2.一种伊木萨克片作用于阴茎勃起功能障碍人血清差异蛋白组合在筛选治疗阴茎勃起功能障碍的药物中的应用；

所述蛋白组合由以下45种蛋白组成；

3.一种伊木萨克片作用于阴茎勃起功能障碍人血清差异蛋白组合在制备治疗阴茎勃起功能障碍的药物中的应用；

所述蛋白组合由以下45种蛋白组成；

4.根据权利要求1～3任意一项所述的应用，其特征在于，所述蛋白组合的筛选方法，包括以下步骤：

1)分别采集正常人组、治疗前阴茎勃起功能障碍组和伊木萨克片治疗后阴茎勃起功能障碍组的空腹血液，离心，得到血清；

2)去除步骤1)所述血清中高丰度蛋白，提取血清中的低丰度蛋白；

3)对步骤2)所述血清中的低丰度蛋白进行酶解，得到肽段；

4)对步骤3)所述肽段进行同位素标记，标记后同组样本混合，得到标记物；

5)采用高效液相色谱对步骤4)所述标记物中的标记肽段进行分离，得到标记后肽段；

6)对步骤5)所述标记后肽段进行纯化，得到纯化后肽段；

7)对步骤6)所述纯化后肽段进行质谱检测，得到质谱原始文件；

8)采用Proteome Discoverer 1.3软件对质谱原始文件进行筛选，得到待处理谱图；

9)采用MASCOT软件对待处理谱图进行搜索，定量分析，得到分析数据；

10)将步骤9)所述分析数据在人数据库中进行检索，得到伊木萨克药物靶点蛋白。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述伊木萨克片治疗后阴茎勃起功能障碍组为给予伊木萨克片口服治疗的患者。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述口服治疗的时间为12～18d；所述口服治疗的剂量为0.8～1.2g/d。

7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤4)所述同位素标记的试剂为iTRAQ试剂。

8.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤8)中所述筛选的参数包括：母离子质量、二级质谱图中最小峰数和信噪比；所述母离子质量为350～6000Da；所述二级质谱图中最小峰数为9～11。

9.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤9)中所述搜索的参数包括：固定修饰、可变修饰、一级质量偏差、二级质量偏差、最大允许漏切数、酶的类型和数据库；所述固定修饰为Carbamidomethyl(C)；所述可变修饰为iTRAQ 4plex(K)和iTRAQ 4；所述一级质量偏差为14～16ppm；所述二级质量偏差为18～22mmu；所述最大允许漏切数为1；所述酶的类型为Trypsin；所述数据库为uniprot20160315。