[发明专利]鸭蛋减产综合征病毒抗体检测方法及其试剂盒有效

专利信息
申请号: 201910018009.8 申请日: 2019-01-09
公开(公告)号: CN111426828B 公开(公告)日: 2023-09-22
发明(设计)人: 李泽君;李雪松;宿鑫;孙海伟 申请(专利权)人: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
主分类号: C07K16/00 分类号: C07K16/00;G01N33/569;G01N33/531
代理公司: 上海序伦律师事务所 31276 代理人: 周东萍
地址: 200241 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 鸭蛋 减产 综合征 病毒 抗体 检测 方法 及其 试剂盒
【说明书】:

发明公开了一种鸭蛋减产综合征病毒抗体检测试剂盒,包含抗鸭蛋减产综合征病毒的抗体、和/或鸭蛋减产综合征病毒的全病毒抗原或其主要免疫原蛋白抗原。本发明还公开了鸭蛋减产综合征病毒抗体检测试剂盒在制备诊断鸭蛋减产综合征的产品中的应用。本发明鸭蛋减产综合征病毒抗体检测试剂盒,可以对鸭蛋减产综合征病毒的抗体进行快速定性和定量检测,在鸭蛋减产综合征的诊断及抗体检测方面具有很好的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域,尤其涉及一种鸭蛋减产综合征病毒抗体检测方法及其试剂盒。

背景技术

中国是一个养禽大国,养禽业迅猛发展,家禽的年饲养量已达120亿羽,居世界首位,我国是世界第一水禽养殖大国和消费大国。虽然近几年水禽饲养量在逐年增长,规模化、产业化经营水平也得到快速提升,但是中国水禽养殖技术相对落后,尤其是水禽传染病的发生,导致水禽养殖的淘汰率高,致使我国水禽产业每年损失高达数百亿元人民币,成为困扰着我国水禽养殖业健康发展的制约因素。

中国的养鸭业面临新发传染性疾病的严重威胁。2016年以来,首先在种鸭场陆续发生了不明原因的产蛋下降,鸭群产蛋率下降20~30%,数周后有一定恢复,但很难恢复到发病前的产蛋率,从而导致种鸭场遭受巨大经济损失。该病的主要症状是蛋鸭产蛋下降,因此将该病命名为鸭蛋减产综合征。经剖检病鸭发现,此病发病前期肝脏有淤血样变,卵巢和输卵管有不同程度损伤。该病在中国不断蔓延,全国主要的蛋鸭生产地区都有该病的暴发,但目前尚无诊断该鸭蛋减产综合征的检测方法及试剂盒,对鸭蛋减产综合征的防控非常不利,急需开发有效的鸭蛋减产综合征检测试剂盒。

发明内容

本发明要解决目前对鸭蛋减产综合征的诊断手段有限的技术问题,提供一种新型鸭蛋减产综合征病毒的抗体检测试剂盒,该新型病毒是从鸭蛋减产综合征发病鸭中分离获得的一株全新的鸭蛋减产综合征病毒,本发明试剂盒可以对鸭蛋减产综合征病毒的抗体进行快速定性和定量检测,对鸭蛋减产综合征作出及时诊断。

为了解决上述技术问题,本发明通过如下技术方案实现:

在本发明的一个方面,提供了一种抗鸭蛋减产综合征病毒的抗体。

优选的,所述抗体是由鸭蛋减产综合征病毒AH204株免疫动物产生的抗体。

优选的,所述抗体是由SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的蛋白或其部分蛋白片段免疫动物产生的抗体,或是由与SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的同源性在98%以上的蛋白或其部分蛋白片段免疫动物产生的抗体。

更优选的,所述抗体是由SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的蛋白或其活性片段免疫动物产生的抗体。

在本发明的另一方面,还提供了一种鸭蛋减产综合征病毒抗体检测试剂盒,包含上述抗体、和/或鸭蛋减产综合征病毒的全病毒抗原或其主要免疫原蛋白抗原。

所述试剂盒检测鸭蛋减产综合征病毒抗体的方法包括:双向琼脂糖扩散试验、间接ELISA方法、或阻断ELISA方法。

优选的,所述用间接ELISA方法或阻断ELISA方法检测鸭蛋减产综合征病毒抗体的试剂盒,还包含ELISA酶标板、酶标二抗、阳性对照血清、阴性对照血清。

优选的,所述用阻断ELISA方法检测鸭蛋减产综合征病毒抗体,包括以下步骤:

用纯化的鸭蛋减产综合征病毒抗原包被ELISA酶标板;

将待测血清与包被抗原作用后,依次加入抗体、酶标二抗和显色液;

利用酶标仪读取吸光度值OD450nm,并按公式:阻断率(%)=(阴性对照的吸光度值-待测样本的吸光度值)/阴性对照的吸光度值×100%,计算待测血清的阻断率,并根据下述判定标准得检测结果:

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