[发明专利]一种酶解制备低分子量κ-卡拉胶钾的方法及应用

权利要求书

1.一种酶解制备低分子量κ-卡拉胶钾的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)在40-50℃水浴锅中，将κ-卡拉胶粉末配成质量浓度为0.5-1.5％的κ-卡拉胶水溶液，搅拌均匀，加入κ-卡拉胶酶，搅拌酶解6-8h；κ-卡拉胶的分子量为100-700kDa，钾离子含量为6.0-6.5％；κ-卡拉胶的来源为天然红藻；初始添加κ-卡拉胶酶的体积分数为0.5-3％；编码所述κ-卡拉胶酶的基因如SEQ ID NO:1所示；

(2)酶解液进行醇沉，得到低分子量κ-卡拉胶寡糖；

(3)配制质量浓度4-10％的κ-卡拉胶寡糖溶液，与质量浓度0.1-2％氯化钾等体积混合，混合液旋蒸浓缩1倍，加入95％乙醇，使酒精计读数在75-78％之间，静置，离心，取沉淀；

沉淀用水复溶到混合液旋蒸后的体积，再次醇沉，保持酒精计读数在75-78％之间，静置，离心，取沉淀；

沉淀复溶旋蒸去除乙醇，冷冻干燥得钾离子含量为8.2-8.8％的低分子量κ-卡拉胶钾。

2.根据权利要求1所述的一种酶解制备低分子量κ-卡拉胶钾的方法，其特征在于，所述步骤(2)中低分子量κ-卡拉胶寡糖的分子量为1-4kDa；低分子量κ-卡拉胶寡糖包括κ-卡拉胶二十二糖和κ-卡拉胶二十四糖，两者所占比例均为40％以上。

3.根据权利要求1所述的一种酶解制备低分子量κ-卡拉胶钾的方法，其特征在于，所述步骤(2)中醇沉方法如下：

1)酶解液离心，取上清，加入95％乙醇，使酒精计读数在45-55％，冷藏静置；

2)取上清，浓缩5-6倍，加入95％乙醇，使酒精计读数在75-78％，冷藏静置；

3)取沉淀，溶于水，旋转蒸发，冷冻干燥，得到低分子量κ-卡拉胶寡糖。

4.根据权利要求1所述的一种酶解制备低分子量κ-卡拉胶钾的方法，其特征在于，所述步骤(3)中的低分子量κ-卡拉胶钾的分子量为1-4kDa。

5.根据权利要求1-4中任意一项所述的一种酶解制备低分子量κ-卡拉胶钾的方法制备的低分子量κ-卡拉胶钾在制备预防或治疗高血压药物中的应用。