[发明专利]spink1抗原、能够特异性结合spink1的抗体及其功能片段及其应用和产品

说明书

本发明涉及生物技术领域，具体而言，提供了spink1抗原、能够特异性结合spink1的抗体及其功能片段及其应用和产品。本发明提供的spink1抗原，包括：SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3及前者任意一种衍生的多肽，具有良好的免疫原性。上述抗原分别得到第一抗体、第二抗体和第三抗体，并获得分别可以产生上述三种抗体的杂交瘤细胞株，抗体的效价高，灵敏度好，结构稳定；杂交瘤细胞可以稳定、高效地产生高质量的spink1的抗体及其功能片段，可以作为工程菌株进行工业化生产。本发明也提供上述抗体及其功能片段的应用和应用其的产品。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及spink1抗原、能够特异性结合spink1的抗体及其功能片段及其应用和产品。

背景技术

丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine protease inhibitors，SERPIN)是分布最广、规模最大的蛋白酶抑制剂超家族，丝氨酸蛋白酶抑制剂kazal1型(serine peptidaseinhibitor Kazal type 1，SPINK1)作为该家族中的一员，近年来受到了广泛的关注，它是一种由56个氨基酸残基组成的分泌性多肽，最主要的功能是抑制胰蛋白酶的活性。

研究表明，SPINK1是一个体内潜在的肿癌生物标志物，它在多种类型的肿癌中均有表达，可以用来识别患者的患病风险以及肿瘤的不良预后。SPINK1高表达于多种肿瘤细胞，包括肝癌，卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、结直肠癌、膀胱癌、胃癌或肾癌等。对SPINK1进行检测和研究对多种肿瘤的调控机理和早期诊断具有重要的意义。

目前，对SPINK1的研究主要集中在相关表达水平、调控机理和核酸水平检测上，而对于SPINK1蛋白检测的领域，大多处于探索的阶段，效果不甚理想，有效抗原仍然不明确，同时用来检测SPINK1蛋白的抗体的产品很少，而这些产品又存在成本高、效价较低(最低作用浓度为0.8ug/ml)的缺陷。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种spink1抗原，以缓解现有技术中对于spink1蛋白的检测缺少有效抗原的技术问题。

本发明的第二目的在于提供一种能够特异性结合spink1的抗体及其功能片段，以缓解现有技术中spink1抗体成本高、效价低的技术问题。

本发明的第三目的在于提供一种产生能够特异性结合spink1的抗体及其功能片段的杂交瘤细胞，该杂交瘤细胞可以稳定、高效地产生高质量的spink1的抗体及其功能片段，可以作为工程菌株进行工业化生产。

本发明的第四目的在于提供一种分离的核酸分子和载体，以便高效快速的表达得到spink1的抗体及其功能片段。

本发明的第五目的在于提供上述spink1抗原或抗体及其功能片段的应用

本发明的第六目的在于提供一种组合物和试剂盒，以缓解现有技术中缺少以spink1为目标靶点的诊断或治疗产品。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种spink1抗原，是如下a)－f)中任一种的多肽：

a)RQTSILIQKSGPC(SEQ ID NO.1)；

b)将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有spink1抗原表位功能的由a)衍生的多肽；

c)MKVTGIFLLSALALLSLS(SEQ ID NO.2)；

d)将SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有spink1抗原表位功能的由c)衍生的多肽；